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Midori Green Advance核酸染料

更新时间:2024-03-14

简要描述:

MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance是传统核酸染色剂溴化乙锭的安全替代品。 它是一种非致癌性和低致突变性染料,具有很高的灵敏度,可用于检测琼脂糖凝胶中的dsDNA,ssDNA和RNA。 MIDORIGreen Advance可以与紫外线或我们创新的蓝/绿LED技术结合使用。

Catalogue number: MG04(货号:MG04)

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining(1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色剂,用于凝胶或后染色)

Benefits(优点):

  • Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels(琼脂糖凝胶中DNA / RNA的完美凝胶内染色)
  • No toxicity, non-carcinogenic(无毒,无致癌性)
  • Safe alternative to ethidium bromide(溴化乙锭的安全替代品
  • High fluorescence(高荧光)
  • Optimal for UV-light(优化适合紫外线)

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下一代凝胶内染色

MIDORIGreen Advance是第二代非致癌染料。 经过紫外线或蓝/绿光激发后,信号更优化。 它保持了诸如非致癌性和优异的信噪比等优势。 如图所示。 1当使用Blue / Green LED技术时,MIDORIGreen Advance比溴乙锭更好。

图1:使用蓝/绿LED透射照明器比较MIDORIGreen Advance(左绿色)和溴化乙锭(右红色)的灵敏度。


MIDORIGreen Advance即使对于较小的DNA片段也显示出很高的灵敏度。 MIDORIGreen Advance的稀释倍数可高达1:25000。 因此,对于100 ml琼脂糖凝胶染色,4-6μl足够,导致?17至25升染色的琼脂糖凝胶。


经验证的安全性

良好地替代诱变的DNA染色剂溴化乙锭以传递强信号是*的。 MIDORIGreen Advance发出的信号强度相当。 但是,不得危及用户的安全。 因此,使用MIDORIGreen Advance进行了几次测试,根据这些测试,MIDORIGreen Advance是安全的。

 

染色Protocol:

凝胶内染色
准备100毫升的琼脂糖凝胶溶液(浓度为0.8-3.0%)并加热,直到溶液*澄清,看不到小的漂浮颗粒。
在凝胶溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain,轻轻混合。将凝胶冷却至50-60ºC,然后将凝胶浇铸到凝胶托盘中。当凝胶为固体时,加载样品并进行电泳。
使用UV或LED照明器检测波段。黄色或绿色的明胶或玻璃纸滤镜应用于摄影。


后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
将要重复使用的染色溶液应优选在黑暗中于室温下保存。
对于<0.5 cm厚的琼脂糖凝胶,每100 ml缓冲液应使用10-25 µl的污渍。
合适的染色时间(5 – 60分钟)和污渍的数量可能取决于凝胶的厚度。


注意:不建议将SDS包含在加载缓冲液中使用,因为由污点和SDS相互作用引起的条带外观!

 

客户常见问题解答(FAQ)

问:我可以将Midori Green Advance与脉冲场凝胶电泳(PFGE)一起使用吗?通常,我使用EtBr进行后期处理。

答:您可以在“Protocol”部分中找到进行后染色的方案。

 

问:您是否有处置Midori Green Advance的详细信息?我了解该分子对光敏感,我想知道MGA凝胶在使用后是否可以在处置前暴露于光下?

答:MGA无毒,足以将其作为化学实验室废物处理。 MGA的发射率会被光破坏,但这并不意味着化学结构会发生变化。但是没有必要破坏分子,因为它仍然无害。与溴化乙锭相比,这是*的优势–无需特殊处理。

 

问:为什么不能以相同方式使用MGA和MGD?

答:化学结构*不同。我们测试过将MGD用作MGA,反之亦然。我们不能同时推荐这两种应用。当您尝试将MGD用作MGA时,您需要大量MGD和阶梯才能获得可观察的波段。通过这种方式可以检测不到低浓度的样品。 MGD设计用于添加样品,并且浓缩程度远低于MGA。以MGA之类的方式使用MGD是非常不经济的–您需要在凝胶中添加10倍以上的量才能观察条带。当您尝试将MGA用作MGD时,也会出现问题,因为MGA的浓度过高,并且运行方向相反。我试图降低MGA浓度,在这种情况下,您会看到一些条带,但它们与所使用的稀释液无关,非常弱。总结一下,您可以说两种染料都是针对不同的应用(在凝胶中和添加到样品中)设计的(具有不同的结构式)和优化的,因此不建议尝试以其他方式使用它们。

 

问:MGA和MGD有什么区别?这些污渍的稳定性如何?

答:主要区别在于Midori Green Advance(MGA)用于凝胶和后染色(意味着它像溴化乙锭一样使用),而Midori Green Direct(MGD)直接添加到样品中。根据凝胶文档系统的不同,我们建议您使用一种或另一种,但您可以在每种照明器(UV 302、365 nm,蓝色照明器和蓝色/绿色透射照明器)中同时使用这两种照明器–只有性能可以提高到合适水平。例如,如果用户使用UV透照器,我们建议使用MGA,因为使用该色斑的效果非常好。我们的蓝/绿色LED仪器和MGD可带来非常出色的性能-*没有背景,而且信号强度很高。两种污渍在室温下均稳定,因此在室温下运输没有问题,但我们建议将污渍保存在4°C下。

 

问:MGA和MGD是否可以与琼脂糖和丙烯酰胺凝胶一起使用?

答:我们的客户给我们反馈说MDG和MGA(染色后)可用于丙烯酰胺凝胶,但主要是为琼脂糖凝胶设计的。

 

问:如果我将MGA在-20°C下保存6天会怎样?可以使用吗?

答:冻结会破坏MGA的功能。您仍然可以尝试,但我们的经验使冷冻后的照明失效。

 

问:我在琼脂糖凝胶中使用Midori Green Advance,为什么在凝胶电泳35分钟后看不见小条带,您有什么建议?

答:Midori Green Advance可能带有电荷,并且与DNA的方向不同,因此凝胶从底部脱色。要查看小乐队,您可以将运行时间减少到25分钟。如果您想让凝胶运行更长的时间,那么您可以*迹。可以使用in凝胶染色,然后缩短后染色时间,或者只对凝胶进行后染色,而无需先进行in凝胶染色。在这两种情况下,整个凝胶都会被染色,并且观察到非常低的分子量带。您也可以使用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。该染料会添加到DNA中,因此无论电泳多长时间,每个条带都会被染色。另一个优点是不存在背景。特别是如果您使用蓝色或蓝色/绿色LED灯代替紫外线,则会收到令人惊奇的信号。

 

问:在Midori Green Advance数据表上,描述了后期处理多可以使用2-3次。您可以在不损失太多敏感性的情况下使用发布后解决方案多长时间?

答:实际上,我们的客户使用频率超过2-3次。如果染色浴始终变暗,您可以在任何情况下使用2-3次而不会降低信号强度。但也可以使用5 – 8次而不会降低信号,具体取决于凝胶的大小和样品量。如果您检测到强度降低,则可以增加一点MGA,从而获得与以前相同的信号强度。

 

问:到期后可以使用MGA吗?

答:是的,您可以使用它。到期日期只是我们保证的短时间,但通常会持续更长的时间。

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