巨噬细胞是一种高度异质性的细胞群,在清除局部组织中的细菌、将危险信号传导给其他免疫细胞,并分泌细胞因子建立局部稳态免疫细胞网络、参与T细胞的再刺激和维持方面起着至关重要的作用。
氯磷酸二钠脂质体(Clodronate Liposomes)是目前为止成熟,通用且经济的一种有效的巨噬细胞清除工具。借助腹腔,尾静脉等多种给药方式实现不同组织部位中巨噬细胞的清除。荷兰LIPOSOMA的产品,货号CP-005-005频频登顶Cell,Nature和Science期刊。
案例一
动物模型:5-8周龄C57BL/6小鼠,DSS诱导的结肠炎模型
巨噬细胞清除方法:
小鼠直肠注射给药100ul脂质体,分别在DSS处理前1天,和后1、3、5天注射
巨噬细胞清除结果:
(A)FACS图显示氯糖脂质体处理小鼠结肠中CD11b+Ly6C+MHCII+巨噬细胞减少。
(B)体重随时间的变化
动物模型:4周或5周龄雄性小鼠,体重18-25g
巨噬细胞清除方法:静脉注射200ul(5mg/ml),也就是1mg。注射时间点:
巨噬细胞清除结果:
脂质体氯膦酸钠清除后效果
案例三
动物模型:7周龄雌性C57BL/6小鼠
巨噬细胞清除方法:在造模前1天腹腔注射150ul,造模后第三天腹腔注射100ul,对照脂质体作为对照组,实验程序原理图:
巨噬细胞清除结果:
案例四
动物模型:3周龄的Ednrb-/-小鼠
巨噬细胞清除方法:小鼠在出生后的第三周结束时被处死采集结肠,在测量终点前的第1天和第4天进行静脉注射100 μL(5 mg/mL)
巨噬细胞清除结果:
肠道巨噬细胞在维持及调节肠道稳态中发挥重要作用。肠道巨噬细胞的异质性,在静息态下不同肠道解剖生态位中的巨噬细胞的不同功能,同时,在病理状态下,肠道巨噬细胞在感染、IBD、术后肠梗阻中所扮演的角色和生理状态不同。
因此,参考文献中,因为分离方法,分离部位以及病理模型不同,通过流式等检测方法展示的群体不是很一致就可以理解了。