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巨噬细胞清除剂的脂质体Liposomes常见制备方法

更新时间:2023-06-22   点击次数:557次

耗竭清除巨噬细胞(Depletion of macrophages)是研究巨噬细胞功能的重要方法。荷兰阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授开发的一款Clodronate Liposomes,货号:CP-005-005,可以利用巨噬细胞的内吞机制,将膜不通透性的氯磷酸二钠(Clodronate)带入细胞内,氯磷酸二钠被释放,当达到一定的浓度时可引发巨噬细胞的凋亡,从而达到去除巨噬细胞的目的。配合PBS脂质体用于对照组实验,以了解巨噬细胞的消耗是否归因于注射氯磷酸二钠脂质体后产生的效果。


脂质体Liposomes是由一层或多层的磷脂分子构成的微小囊泡,被广泛应用于药物传递、基因转移、生物传感、成像检测等领域。


靶点科技介绍脂质体的常见制备方法。


1. 脂质体的基础结构

在制备脂质体之前,需要了解脂质体的基础结构,以更好地理解它们的制备过程。脂质体由一个或多个磷脂分子和一个或多个胆固醇分子,以及其他辅助物质(如表面活性剂、离子、蛋白质等)构成。在生物体系中,脂质体是细胞膜的重要组成部分,对于维持细胞内外环境平衡、物质传递等具有重要作用。


2. 制备脂质体的基本步骤

制备脂质体的基本步骤包括:

(1)选取适当配比的磷脂分子和胆固醇分子,并将它们混合在一起;


(2)加入脂质体所需的其他辅助物质,如表面活性剂、离子、蛋白质等,以便改进脂质体的性质;


(3)用适当的方法将混合物分散成微小的囊泡,使其形成脂质体。


靶点科技将分别介绍每个步骤的常用方法。


3. 选取磷脂和胆固醇

所选择的磷脂和胆固醇组合对脂质体的特性和功能有很大的影响。常用的磷脂包括卵磷脂、磷脂酰肌醇、羟基磷脂、磷脂酰丝氨酸等。卵磷脂常被用于脂质体制备中,因为它与胆固醇的组合效果好,形成脂质体的韧性和稳定性更好。而胆固醇是必须的辅助成分,它可使脂质体抗溶解力增强,并且可以提高其透过细胞壁的能力。


4. 加入其他辅助物质

在制备过程中,可以加入表面活性剂或其他分子,以增强脂质体的性质。如二十烷基磺酸钠(SDS)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)等,加入后可以使脂质体的稳定性大大提高。


5. 制备脂质体

有多种方法可以制备脂质体,其中两种较为常见的方法如下。

(1)通过机械分散法制备脂质体

这是常用的方法之一。首先需要将所选的磷脂分子和胆固醇混合在一起,并将其溶解到有机溶剂(如甲醇、氯仿等)中。随后将混合物加入离心管中,将所需的其他辅助物质一起加入。接着,使用超声或高压处理将液体分散成一个微小的泡泡——脂质体。


(2)通过溶剂蒸发冷凝法制备脂质体

这种方法与机械分散法略有不同。选择适当的溶剂蒸发冷凝剂将所选的磷脂和其他成分混合在一起,形成脂质体。该方法的优点在于无需使用超声波或高压力,操作比较简单,且制备效率较高。其中,常用的溶剂蒸发冷凝剂有乙酸乙酯/乙醇、氯仿/甲醇、N,N-二甲基乙酰胺(DMSO)/水等。


6. 脂质体的应用

制备好的脂质体在药物和基因传递等领域中具有广泛应用。为了达到最佳效果,脂质体需要以适当的浓度和用途用于预定的细胞或生物体系中。例如,脂质体和药物的相互作用可以促进药物的运输和传输,提高药物的生物利用度;而基因载体脂质体可以在细胞内部进行基因转移,从而实现相应的基因治疗。


脂质体的制备方法有很多,但它们的基础结构和特性大致相同。在制备过程中,需要选取适当的磷脂和胆固醇、加入其他辅助物质,并用适当的方法制备脂质体。在实际应用中,需要根据脂质体的特性和细胞的需要来选择合适的方法和条件。

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