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悬浮细胞和贴壁细胞基础知识介绍

更新时间:2024-03-16   点击次数:185次

体外培养细胞,根据它们是否能贴附在支持物上生长的特性,可分为悬浮型贴壁型两大类。

(一)悬浮型细胞

简称悬浮细胞。在体外培养时,这些细胞属于非贴壁依赖的细胞,这些细胞的细胞质膜也会与培养液底发生黏连,但最多不超过5%的表面与培养液底发生类似于细胞连接样的黏连,显微视场下细胞往往呈球形。

悬浮型细胞主要是来源于血液、淋巴组织的细胞,骨髓瘤构建的各种杂交瘤细胞,某些肿瘤细胞和转化细胞。

细胞呈圆形,一般不贴于支持物上,呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。

体外培养的细胞类型中,少数细胞种类在培养时不贴附于支持物上,而以悬浮状态生长,包括一些取自血、脾或骨髓的原代细胞,尤其是血液白细胞,以及一些肿瘤细胞。某些来源于此类细胞的细胞株或细胞系也呈悬浮状态生长。

细胞悬浮生长时可以呈单个细胞或细小的细胞团,胞体为圆形。其优点是在培养液中生长,生存空间大,允许长时间生长,便于大量繁殖。

属于悬浮型细胞常见的细胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0,人造血系肿瘤细胞U937(见文章结尾图片)、HL60、K562(见文章结尾图片)等。技术详情联系靶点科技技术支持。

(二)贴壁型细胞

简称贴壁细胞。在体外培养时,贴壁型细胞就是那些贴壁依赖的细胞,在汇合成单层生长以前,它们的细胞质膜超过30%的表面与培养液底发生类似与细胞连接样的黏连,显微视场下细胞一般为扁平状的各种形态。需要注意的是,贴壁型细胞汇合生长形成单层以后,失去接触抑制的那些细胞株或细胞系的细胞培养物中,常常可见或多或少的悬浮样细胞出现。

贴壁型细胞包括大多数哺乳动物的淋巴和血液以外的组织细胞,以及多数肿瘤细胞。需要贴附在带适量正电荷的固体或半固体表面才能正常生长和分裂。
大多数培养细胞均为贴壁型,它们必须贴附在支持物表面生长,这类细胞在体内时各自具有其特殊的形态,但在体外培养时贴附于支持物后形态上表现单一化而失去体内原有的某些特征,多呈上皮样或成纤维细胞样。

正常贴壁型细胞具有接触抑制和密度抑制的双重特性,细胞相互接触后可抑制细胞的运动,因此细胞不会相互重叠于其上面生长。细胞生长、汇合成片后,虽发生接触抑制,但只要营养充分,仍可增殖分裂,但当细胞数量达到一定密度后,由于营养的枯竭和代谢物的影响,细胞分裂停止,称为密度抑制。

肿瘤细胞的接触抑制及密度抑制往往减弱或消失,因此细胞可向三维空间发展,导致细胞堆积,并可生长至较高的终末细胞密度。

贴壁细胞类型有以下几种常见类型

1.成纤维细胞型

细胞呈梭形、扇形、星形或不规则三角形,中央有卵圆形核,胞质常向外伸出3-5个长短不一的突起,生长时呈放射状。细胞汇合过程中,细胞的生长呈放射状、火焰状或漩涡状。

除了真正的成纤维细胞外,凡由中胚层间充质起源的组织,如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈成纤维细胞形态。培养中细胞的形态与成纤维细胞类似时皆可称之为成纤维细胞(图10-2)。

2.上皮型细胞

细胞呈扁平不规则多边形,中央有圆形核,细胞外观透明,细胞彼此紧密相连成单层生长。生长时呈膜状移动,处于膜边缘的细胞总与膜相连,很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。上皮细胞传代培养后形态特征逐渐趋于典型。

3.游走细胞型

呈散在生长,一般不连成片,胞质常突起,呈活跃游走或变形运动,速度快且方向不规则。此型细胞不稳定,有时难以和其他细胞相区别。起源于网状内皮系统的细胞属于此类型。

4.多型细胞型

有一些细胞,如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态,统归于此类。此类细胞在培养时,其形态结构容易受培养条件(基质、温度、pH、营养、污染状况和培养方式等)影响。

如角膜上皮细胞在胶原基质上的形态与体内天然形态相似,但在塑料基质表面细胞呈单层生长,细胞呈扁平形。上皮型Hela细胞在偏酸或偏碱的培养环境下会停止生长,细胞形态呈梭形、不规则形,及时纠正pH后,细胞又恢复原来的正常形态。

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