单核-巨噬细胞包括骨髓中的前单核细胞、外周血中的单核细胞、以及组织内的巨噬细胞(Mφ)。Mφ来源于血液中的单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。单核细胞是一种单个核的吞噬细胞，来源于骨髓髓样祖细胞，主要分布于血液循环系统，参与机体免疫应答和炎症反应。单核细胞可分为经典型(CD14++CDI6-)、中间型(CD14++CD16+)和非经典型(CD14+CD16++)单核细胞。单核细胞表型分析，建议通过流式细胞术对循环单核细胞进行亚群分析。
正常情况下，根据外周血单核细胞表面标志物CD14和CD16的表达水平，单核细胞被划分为三个主要亚群：经典单核细胞（cMo，特征为CD14++CD16-），中间型单核细胞（iMo，表现为CD14++CD16+），以及非经典或异型单核细胞（ncMo，通常定义为CD14-low/NEGCD16+）。在健康人中，cMo约占单核细胞总数的大约85%，而iMo占比约为5%，ncMo则大约占剩余的10%左右。
人，单核细胞可以根据表面CD14和CD16被细分为三个主要的亚群：
经典单核细胞（CD14hiCD16-）：约90%的单核细胞属于这一类，具有高CD14但不表达CD16。
中间单核细胞CD14hiCD16+）：高CD14和低CD16表达。
非经典单核细胞（CD14-/lowCD16+）：具有相对较低CD14表达和高CD16。
小鼠，单核细胞根据表面标志和功能特性被分为两种主要类型：
经典单核细胞：Classical Monocytes (CM)，（高表达Ly6C）：通过CCR2受体响应CCL2（趋化因子），主要参与炎症反应，在组织损伤或感染时大量募集。
非经典单核细胞： NonClassical Monocytes（NCM），（低表达Ly6C）：又被称为巡逻型单核细胞，高表达CX3CR1受体，主要在血管壁内爬行和监视微环境，对组织修复和抗炎具有重要作用。
我们在清除单核巨噬细胞时，早期使用抗体CCR2，后来使用CD11b-DTR小鼠，再后来上世纪90年代末荷兰免疫学家Nico VonRoojen教授开发了单核巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes氯膦酸盐盐脂质体（商业化的荷兰Liposoma品牌）。荷兰Liposoma品牌Clodronate Liposomes氯膦酸盐盐脂质体频频见刊于Cell，Nature和Science。但是这三种方法，对单核细胞的清除，有哪些差异呢？作为一个基础研究，对我们设计实验和选择试剂很重要。尤其现在的研究，颗粒度和精准度越来越高，简单的黑盒实验，不能细分到具体的细胞亚群清除的差异，因此，我们可以参考JCI的这篇文献。
论文信息：
论文题目： Spleen-derived classical monocytes mediate lung ischemia-reperfusion injury through IL-1β
期刊名称：J Clin Invest.
时间期卷：2018;128(7):2833–2847
在线时间：2018年5月21日
DOI：doi.org/10.1172/JCI98436.
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
办事处：Target Technology（靶点科技）
正常小鼠，静脉注射Clo-lip（Clodronate Liposomes，荷兰Liposoma），腹腔注射DT（Listlabs），静脉注射抗体CCR2。24小时后取样外周血和脾脏。如下图。
外周血：Clodronate Liposomes和DT，无论对于经典单核细胞和非经典单核细胞，都有显著效果。尤其荷兰Liposoma的Clodronate Liposomes，几乎将Ly6C阳性的细胞都清除了。CCR2抗体主要清除类似招募的CM。
脾脏：CCR2抗体的清除效果模式类似外周血。荷兰Liposoma的Clodronate Liposomes的脾脏NCM清除效果也很显著。
对于这个数据，我们需要辩证的看。首先是注射方式，其次是注射剂量，还有取样方法。此外，取样时间点，选择的Marker，还有样品制备的方法，这些细节，都很重要。都是我们自己的数据和别人数据不一样的原因。别的数据仅仅是参考，需要我们自己做出来，才是自己的。才有助于进一步推进自己的实验。
