皮肤巨噬细胞是皮肤组织损伤后免疫反应的主要效应细胞。皮肤中主要有两大类免疫细胞：DC细胞和巨噬细胞。皮肤被一层基膜分为了表皮和真皮，真皮层中的细胞相对来说更为复杂，包括：真皮层中驻留的cDC细胞（来源于真皮层血管中的pre-cDC细胞）、血管中Ly6Chi的单核细胞外渗出血管后可分化为单核源的DC细胞和真皮巨噬细胞。表皮层主要是朗格汉斯细胞（LCs），其来源于卵黄囊。因此，皮肤中的巨噬细胞分为两大类：表皮层的朗格汉斯细胞和真皮层的真皮巨噬细胞。
皮肤巨噬细胞在皮肤损伤修复，瘢痕的不同阶段，根据局部微环境的不同会发生明显的表型和功能改变。巨噬细胞在瘢痕形成中显著的作用是通过分泌基质金属蛋白酶(MMPs)直接或间接的影响瘢痕的形成。巨噬细胞在伤口愈合的组织修复和再生中起着重要作用。早期阶段：M1型巨噬细胞主要分布在创伤早期，而M2型巨噬细胞主要分布在创伤晚期和增生性瘢痕的增生期。在皮肤伤口愈合中，M1型巨噬细胞的数量在7-14天达到峰值，而在增厚性瘢痕组织中，M2型巨噬细胞的数量在14-28天增加。巨噬细胞在皮肤创伤修复的不同阶段表现出不同的功能。若创伤炎症期延长，可能会导致瘢痕形成。在伤口微环境中，巨噬细胞可诱导成纤维细胞增殖、肌成纤维细胞分化和胶原沉积。巨噬细胞数量和表型的改变可以干扰伤口愈合的过程，并决定瘢痕形成的程度。
如何分离皮肤巨噬细胞？如何验证用流式方法圈门确认分离的皮肤巨噬细胞？可以参考如下文献的方法和数据。
皮肤巨噬细胞流式圈门策略解决方案
a. 皮肤巨噬细胞代表性的流式细胞术门控策略，在设门 CD11b、F4/80 细胞之前，排除 Ly6G 中性粒细胞和 SiglecF 嗜酸性粒细胞。b.Ly6C 在 F4/80 高/低亚群中的表达，表明这些标志物表达呈负相关。F4/80 High的巨噬细胞，高表达Ly6C Low，比例约为80%；F4/80 Low的巨噬细胞，高表达Ly6C High，比例约为80%。
论文信息：
论文题目：Local administration of regulatory T cells promotes tissue healing
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：15, Article number: 7863 (2024)
在线时间：2024年9月9日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-024-51353-2
如果需要清除巨噬细胞，巨噬细胞清除产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
办事处：Target Technology（靶点科技）
Macrophage depletion by CL
Ten-week-old male wildtype C57BL/6J mice received intraperitoneal injections of clodronate encapsulated in liposomes or control PBS liposomes (200 μl of 5 mg/ml) (Liposoma B.V., CP-005-005) 1 day before injury. Injections continued every other day until day 7 post-injury to deplete macrophages. Efficiency of macrophage depletion was validated by assessing F4/80+ macrophage levels within the CD11b+ myeloid cell population in spleen using flow cytometry.
