将一根导线插入股动脉（FA）产生了血管内损伤，并检查了周围脂肪组织（PVAT）中的炎症反应。考虑到雌激素对血管系统的显著影响，研究使用了雄性或去势雌性小鼠。多种免疫细胞基因在血管损伤后24小时内在PVAT中上调，包括单核细胞-巨噬细胞标记基因Cd11b、Cd11c、Mrc1和Adgre1（F4/80）（图1a）。免疫组化染色显示，在损伤后早期阶段（3天），F4/80巨噬细胞主要积聚在围绕血管的外部组织中，这些组织主要由PVAT组成，而不是在血管组织中（图1b，c）。然后，这些F4/80巨噬细胞在损伤后的晚期（14天）扩散到血管组织中（图1b，c）。与此同时，TNF（TNF-α）、Serpine1（PAI-1）、Il1a和Il1b等炎症细胞因子基因的表达在血管损伤后在周围组织中显著上调（图1d）。
对受伤或假手术操作的动脉周围的特定脂肪组织(PVAT)进行转录组分析显示，除了几种免疫细胞标志基因和炎症细胞因子的表达水平增加外，血管损伤引起的BAT标志基因的表达水平显著增加，包括Ucp1、Cidea、Cox8b、Ppargc1a、Elovl3和Dio2，这通过实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)分析得到了证实（图1e）。通过原位杂交分析（图1f）和免疫组织化学分析（图1g, h）确认了血管损伤后PVAT中UCP1的上调。形态学上，与假手术后的脂肪细胞相比，血管损伤后的PVAT中的脂肪细胞具有米色/棕色脂肪特征，包括更小的细胞大小和多房脂滴（图1g, i）。WB印迹分析也显示在去除血管的外部组织中UCP1的增加，而不是保留的动脉（图1j）。然后，我们检查了浸润的巨噬细胞在UCP1上调中的作用。通过给予荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂氯膦酸脂质体清除巨噬细胞后，显著减轻了血管损伤后的UCP1上调（图1k, l）。卵巢切除术对BAT标志物如Ucp1和Elovl3的表达水平影响有限，而血管损伤后这些标志物的上调在卵巢切除小鼠中比对照组更为明显（补充图1b）。在完整的生殖腺雄性小鼠中观察到血管损伤后UCP1显著上调及脂肪细胞细胞大小的形态学缩小（补充图1c, d）。综上所述，这些结果表明，在雌性卵巢切除小鼠和雄性小鼠中，血管损伤引发巨噬细胞浸润PVAT，诱导PVAT转变为BAT样表型，类似于在寒冷或β3AR激动剂的影响下观察到的皮下和内脏WAT的“变色"现象。
股动脉外层组织巨噬细胞清除方案和免疫组化检测效果解决方案：
给药剂量：200ul/小鼠
注射方式：腹腔注射
时间点：建模当天Day1和Day7， 一共两次
检测手段：IHC，见图K和I。
样本：股动脉外层组织
论文信息：
论文题目：Beiging of perivascular adipose tissue regulates its inflammation and vascular remodeling
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：13, Article number: 5117 (2022)
在线时间：2022年9月7日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-022-32658-6
产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
办事处：Target Technology(靶点科技)
ClodronateLiposomes氯膦酸盐二钠脂质体清除单核巨噬细胞，在血管损伤诱导的炎性模型中单核巨噬细胞功能研究，荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes见刊于Nature Communications：周围血管脂肪组织的肥大调节其炎症和血管重塑。
