贴壁细胞:
常见的成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞等,这些都是需要贴壁生长的,即需要物理附着于基质或细胞外基质才能生长和繁殖,许多常见的原代和连续细胞系都是贴壁的。
贴壁细胞一般都来于体内的实体组织,它们需要依附基质固定在一个位置生长,因此为达到稳定,其表面有着丰富的黏附受体,存在多种“黏附分子" 和 “细胞外基质受体",常见比如整合素、钙黏素等。在体外培养时,以上这些物质能识别培养表面的带电基团(培养耗材有电荷)或人工包被的ECM蛋白或多赖氨酸等。
悬浮细胞:
常见于血液中,它们经常存在于流动的血液环境当中,常见如红细胞、白细胞,还有淋巴液中的淋巴细胞(T细胞、NK细胞),它们在人体内就需要随着体液流动,才能到达发挥作用的部位。
悬浮细胞体外培养时往往需要外界力来提供动态环境,促进其生长繁殖,普遍是采用容器震荡来模拟,一方面可以促使细胞更容易发生气体交换,另外也让液体养料均匀化。常用到的培养器具有摇瓶或生物反应器,与此同时,悬浮培养对血清的需求更低,甚至可以在没有血清或低血清的条件下生长。
悬浮细胞则通常缺乏上述功能性黏附受体表达,要么这些分子的活性被抑制,甚至有些会具有抑制黏附的表面结构,如某些细胞表面覆盖较厚的糖萼(多糖结构),带负电荷的多糖链可产生空间位阻和静电斥力,防止细胞与基质或其他细胞黏附。
细胞驯化:
工业生产中,常见将贴壁细胞驯化为悬浮细胞是生物制药工业中的一项关键技术,旨在实现大规模、高产量、低成本的生物制品生产。现在商业中已成功驯化细胞有CHO、293T,这两类细胞本身具有双重生长特性,既可以贴壁生长,也可以悬浮生长,通过培养基和添加物诱导筛选可达到。
悬浮细胞固定:
为什么要固定?比如需要用悬浮细胞做免疫荧光;需要单层的悬浮细胞;需要均匀的刺激悬浮细胞等情况下,我们就期望悬浮细胞能像贴壁细胞一样就好。传统的方法就是涂片,甩片等各种手段,都不尽人意。靶点科技悬浮细胞固定免疫荧光专用玻片,有效的解决了这个痛点。简单四步,再也不用谈虎色变,望洋兴叹。