Brainbits Hibernate 培养基是一种不依赖于 CO2 的营养培养基，用于维持神经细胞、组织和组织切片。Hibernate 培养基已进行优化，可用于在环境二氧化碳水平中维持成熟和不成熟细胞或组织。Brainbits Hibernate 培养基可让神经元在环境 CO2 水平下维持长达 48 小时。这为科学家在运行台式活细胞实验时提供更大的便利和控制，比如显微镜、流式细胞分析以及其他生理学研究。Brainbits Hibernate 培养基还可在冷藏环境下保存具有活性的大脑组织直至处理达 1 个月，以及维持组织切片。
Hibernate A 和 Hibernate E的区别
Brainbits Hibernate 培养基有两种类型，Hibernate A 和 Hibernate E。
Hibernate-E is useful for embryonic tissue while Hibernate-A is useful for adult tissue.
Brainbits Hibernate A培养基用于出生后组织样品。A就是Adult，成年人或者成年动物。
Brainbits Hibernate E培养基用于胚胎神经元使用。A就是Embryo，胚或者胚胎。
Brainbits Hibernate 培养基两种产品的配方相似，主要的区别的在于渗透压，Hibernate A培养基的渗透压范围高于 Hibernate E培养基。
Hibernate E minus Calcium和Hibernate A minus Calcium的区别
两者都是 Hibernate E培养基和Hibernate A培养基的基础上，不含钙离子。
Hibernate A minus Calcium培养基的实物图片
Hibernate E minus Calcium培养基的实物图片
培养大鼠胚胎海马神经元和大脑皮层神经元
1. 从受精18天的大鼠胚胎中分离大脑皮层和双侧海马
2. 在预置了Hibernate E培养基（Brainbits，靶点科技）的锥形管中收集所有的组织。放置，直到所有的组织都已解体。
3. 使组织沉积在管的底部，然后小心地去除上清液，只留下刚好可覆盖组织的最少量的培养基。
4. 在不含钙离子的Hibernate E minus Calcium培养基（Brainbits，靶点科技）中，使用2 mg/mL过滤灭菌的木瓜蛋白酶溶液，在30°C酶解组织大约30 min，其间每5 min轻摇锥形管以帮助降解。每对海马组织使用2 mL酶溶液。
5. 加入两倍体积的Hibernate E培养（Brainbits，靶点科技）基以恢复二价阳离子的浓度，停止酶解。
6. 使未解离的组织沉降至管底（约2 min），然后把上清液转移到15 mL离心管中，以150×g离心5 min。
7. 在1 mL神经元培养基中重悬沉淀物，取一小份(例如10 μL)进行细胞计数。
大鼠胚胎原代海马和皮层神经元操作步骤
1. 用无菌的冷的0.05 mg/mL多聚赖氨酸水溶液包被培养表面(玻璃或细胞培养级塑料)，每平方厘米表面使用0.15 mL，在室温下保温1 h。
2. 去除多聚赖氨酸溶液，并用无菌蒸馏水冲洗两次(须清洗，因为多聚赖氨酸对细胞有毒性)。在超净工作台中打开培养板的盖子通风，直到每个孔都干燥。培养板干燥后可以立即使用或在4°C最多保存2周。
3. 根据标准实验室程序或随细胞提供的说明书分离原代的大鼠神经元或解冻冻存的原代大鼠神经元。
4. 在预热的(37°C)神经元培养基中接种细胞，建议的细胞密度为160个细胞/mm2，或必要时使用自行优化的细胞密度。对于海马神经元，培养基中须添加25 μM L-谷氨酸
5. 在36°C至38°C，含5%二氧化碳的潮湿环境中培养（使用自然空气也是可接受的，但推荐含9%氧气和5%二氧化碳的气体环境）。
6. 培养4-24 h后，更换一半体积的新鲜培养基，继续在培养箱中培养。
7.对海马神经元以外的细胞：在接种4天后，更换一半体积的新鲜的培养基，之后每三天重复一次。对海马神经元：接种三天后，用不含L-谷氨酸的新鲜培养基更换一半体积的培养基。之后每三天重复一次。
