组织驻留巨噬细胞是一类异质性的免疫细胞群体，参与组织稳态、重塑和免疫监视。在睾丸中，组织驻留巨噬细胞占体细胞群体的很大比例，是主要的白细胞类型（占比超过CD45至少50%以上）。睾丸组织驻留巨噬细胞被认为在发育期和成年期具有多种功能。在胚胎期，它们调控血管生成和形态发生。早期对出生后小鼠的研究，主要分析培养中分离的细胞类型，暗示了睾丸巨噬细胞对类固醇生成的重要性。在体内稳态条件下，有报道显示组织驻留巨噬细胞提供了适宜的组织微环境，支持莱迪希细胞功能，并协助精原细胞分化。睾丸巨噬细胞还被认为与维持睾丸的免疫抑制环境有关。
在睾丸中已经鉴定出两种组织驻留巨噬细胞群体。小管周巨噬细胞位于精曲小管表面，紧邻小管周肌样细胞，而间质巨噬细胞则分布在睾丸间质中，与Leydig细胞密切接触。目前，普遍认为小管周巨噬细胞来源于循环的骨髓来源单核细胞，而间质巨噬细胞则起源于胎儿卵黄囊来源的细胞，但出生后会被骨髓来源的巨噬细胞所替代。然而，目前尚未有关于睾丸巨噬细胞发展全景的高分辨率单细胞综合分析的报道。
在本研究中，我们结合细胞命运追踪、荷兰Liposoma氯膦酸盐脂质体联合抗体清除睾丸巨噬细胞，以及巨噬细胞缺陷小鼠实验，采用深入的高维单细胞蛋白质组学分析，研究睾丸组织驻留巨噬细胞的发育起源及更新。我们证明，在正常生理条件下，成年睾丸的组织驻留巨噬细胞来源于胚胎前体细胞，而出生后这些巨噬细胞对精子发生并非必需。这一发现深刻改变了我们对睾丸巨噬细胞异质性、起源及功能的理解，并揭示了其与其他部位组织驻留巨噬细胞相比的独特适应性。
睾丸巨噬细胞Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体清除文献参考解决方案：
种属：小鼠
年龄：十天
试剂：CSF1中和抗体（Bioxcell，美国）和clodronateliposomes氯膦酸盐脂质体（Liposoma，荷兰），以消耗组织巨噬细胞和血液单核细胞。
方法：腹腔注射CSF1抗体（Bio X Cell，克隆5A1）或IgG1同型对照（Bio X Cell，克隆HRPN）（第一周期500 µg，第二和第三周期250 µg），随后在次日静脉注射ClodronateLiposomes氯膦酸盐脂质体或ControlLiposomes空白对照脂质体（Liposoma；体积50 µl）。每三天进行三个连续的注射周期。
取样：在最后一次ClodronateLiposomes氯膦酸盐脂质体注射40小时、11天或21天后采集组织进行流式细胞术和成像分析
αCSF1：CSF1中和抗体；Clod：ClodronateLiposomes
检测：
恢复：
骨髓来源的单核细胞至少在3周时间内，无法占据即使被清除剂定居巨噬细胞所空出的睾丸生态位。
如何清除睾丸巨噬细胞？详细信息可以参考如下文献。
论文信息：
论文题目：Generation, localization and functions of macrophages during the development of testis
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：11, Article number: 4375 (2020)
在线时间：2020年9月1日
DOI： doi.org/10.1038/s41467-020-18206-0
产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes&Control Liposomes
办事处：Target Technology(靶点科技)
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体联合抗体清除骨髓，骨髓来源的血液单核，还有重点研究的部位睾丸巨噬细胞，荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes见刊于Nature Communications：睾丸发育过程中巨噬细胞的产生、定位及功能。
Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes氯膦酸二钠脂质体清除睾丸巨噬细胞的材料和方法：
Ten-day-old wild-type mice were treated with CSF1 neutralizing antibody and clodronate-containing liposomes to deplete tissue macrophages and blood monocytes. Intraperitoneal injection of CSF1 antibody (Bio X Cell, clone 5A1) or IgG1 isotype control (Bio X Cell, clone HRPN) (500 µg on the first cycle, 250 µg on the second and third cycles) was followed by intravenous administration of clodronate-containing or empty control liposomes (Liposoma; in 50 µl volume) on a subsequent day. Three consecutive treatment cycles were performed at three-day intervals. Tissues were harvested for flow cytometry and imaging analyses 40 h, 11 days, or 21 days after the last clodronate injection
材料和方法文献截图：
