Covaris现货520045 microTUBE AFA Fiber产品选购指南

产品描述

货号：520045  

英文名：microTUBE AFA Fiber Pre-Slit Snap-Cap 6x16mm (25)  

中文名：微管AFA纤维预切口卡扣盖6x16mm（25支装）  

品牌：Covaris  

规格：25个/包  

适用场景：DNA/RNA片段化、染色质剪切（ChIP实验）、低起始量样本处理（如单细胞或微量组织）。  

产品特点

1. 精准片段化  

  • 基于AFA技术，通过高频短波长（1 MHz）声波聚焦，实现DNA/RNA片段化长度可控，重复性高（CV<5%）。  

  • 支持非接触式处理，避免交叉污染，减少样本损失。  

2. 等温处理  

  • 水浴恒温系统（默认20°C）确保实验过程中温度波动≤±2°C，保护热敏感样本的完整性。  

3. 高兼容性  

  • 适配微量样本（13–300 μl），尤其适用于FFPE组织、单细胞或低起始量的染色质剪切。  

  • 兼容Covaris SonoLab软件，支持自定义参数设置。  

4. 耐用性与安全性  

  • 卡扣盖设计防止液体泄漏，透明管体便于实时观察。  

  • 耐化学腐蚀，可反复使用。  

储存条件

• 环境：常温（15–25°C），避免高温（>30°C）或低温（<5°C）。  

• 湿度：相对湿度≤60%，远离阳光直射及潮湿环境。  

• 保质期：未开封状态下保质期1年，开封后建议6个月内使用完毕。  

工作原理

1. AFA技术核心  

  • 通过压电陶瓷换能器将电能转化为高频声波（1 MHz），聚焦于样本区域，产生瞬时高压（>50 MPa）导致核酸链断裂。  

  • 能量密度和占空比可调节，控制片段化程度。例如：  

    ◦ DNA剪切：典型参数为200 W功率、20%占空比、200次循环/爆发，处理时间30秒。  

    ◦ 染色质剪切：低功率（55 W）、低占空比（5%），避免组蛋白修饰酶失活。  

2. 样本处理流程  

  • 离心预处理：样本需离心（3000×g，30秒）去除气泡，确保均匀分布。  

  • 水浴恒温：将微管置于水浴槽中，通过循环水维持温度稳定。  

  • 超声处理：仪器自动控制声波聚焦位置与时间，生成目标片段。  

解决实验中的关键问题

1. 片段化不均  

  • 传统超声或酶切法易导致片段大小分布宽泛，AFA技术通过精准能量控制实现单分散性片段。  

2. 交叉污染风险  

  • 非接触式处理避免样本间污染，尤其适用于病原体检测或临床样本分析。  

3. 热损伤  

  • 等温条件保护DNA/RNA二级结构及蛋白质表位，适用于ChIP-seq等下游应用。  

4. 低起始量样本处理  

  • 支持微量样本的片段化，减少因样本量不足导致的实验失败。  

使用方法

步骤1：样本准备  

• 样本类型：基因组DNA、FFPE提取的DNA、染色质、RNA等。  

• 体积要求：13–300 μl（推荐130–150 μl），浓度≥50 ng/μl。  

步骤2：安装微管  

1. 将microTUBE插入Holder XTU的卡槽中。  

2. 确保管体与Holder紧密贴合，避免超声过程中移位。  

步骤3：设置参数  

• 软件设置：通过SonoLab软件选择预设程序，或自定义参数：  

 • 功率：55–200 W（根据样本类型调整）。  

 • 占空比：5–20%。  

 • 循环次数：100–500次。  

• 水浴温度：默认20°C，可手动调节至15–25°C。  

步骤4：运行程序  

• 启动超声处理，仪器自动记录能量输出与时间。  

• 处理完成后，取出微管并离心（3000×g，30秒）去除残留液滴。  

步骤5：质量检测  

• 使用Agilent 2100 Bioanalyzer或High Sensitivity DNA Kit验证片段分布。  

常见问题与解决方案

问题1：片段大小偏离预期  

• 原因：参数设置错误、样本纯度不足。  

• 解决：校准仪器能量输出，纯化样本。  

问题2：样本污染  

• 原因：Holder未清洁或卡扣盖密封不严。  

• 解决：每次实验后使用70%乙醇擦拭Holder，更换新卡扣盖。  

问题3：微管破裂  

• 原因：过度离心或机械撞击。  

• 解决：避免高速离心（>5000×g），轻拿轻放。  

问题4：仪器报错“水位不足"  

• 原因：水浴槽水位过低或传感器堵塞。  

• 解决：补充水至MAX线，清洁水位探头。  

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