髓系和淋系细胞如何流式圈门？

圈门 (Gating)：在流式散点图 / 直方图中划定区域，筛选目标细胞群，排除碎片、死细胞、粘连细胞、杂质。常用视图：FSC（前向散射，细胞大小）、SSC（侧向散射，细胞颗粒度 / 复杂度）、荧光通道。

通用标准圈门流程（通用所有细胞，必按顺序）

1. 第一步：FSC-A vs SSC-A → 圈总细胞群（去除碎片 / 杂质）

• FSC：细胞体积越大，信号越强；

• SSC：胞内颗粒、细胞器越多，信号越强（巨噬细胞 SSC 偏高，神经元中等）。

• 操作：圈出集中的主细胞团，左侧 / 下方零散小点为细胞碎片、死细胞、灰尘，直接排除。

2. 第二步：FSC-A vs FSC-H → 圈单细胞（排除粘连体 / 团块）

• 细胞粘连、双细胞 / 多细胞团，会在对角线右上方形成散点；

• 只圈对角线上的单细胞群体，剔除粘连细胞，避免结果假性偏高。

3. 第三步：死活细胞圈门（推荐优先做）

1. 染料染色（PI、7-AAD、DAPI）

   死细胞膜破损，染料入胞发荧光；活细胞无荧光。直接圈阴性群 = 活细胞。

2. 无死活染料：结合 FSC/SSC 辅助

   死细胞通常 FSC 降低、SSC 升高，从第一步细胞群里剔除。

4. 第四步：荧光标记圈门（目标亚群 / 蛋白）

• 分界线左侧：阴性表达；右侧：阳性表达。

• 原则：对照管优先，切勿凭肉眼主观划线。

髓系和淋系细胞如何流式圈门？可以参考如下文献。

论文信息：

论文题目：Protein kinase C delta regulates mononuclear phagocytes and hinders response to immunotherapy in cancer

期刊名称：Science Advances

时间期卷：Vol 7, Issue 51(2023)

在线时间：2023年12月22日

DOI: 10.1126/sciadv.add3231

产品信息：

货号：CP-005-005

规格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

产地：荷兰

名称：Clodronate Liposomes&Control Liposomes氯膦酸盐脂质体套装

办事处：靶点科技