急性炎症是一种保护性反应，旨在杀灭入侵的病原体，通常是自限性的，并最终导向愈合。然而，免疫细胞的失控激活以及急性炎症反应无法自限，将导致慢性炎症，进而引起组织损伤。在组织损伤或感染后，单核细胞从循环中被募集，并分化为M1型巨噬细胞，后者通过释放炎性细胞因子、活性氧、蛋白酶和抗菌肽来促进炎症反应。随后，巨噬细胞获得强效的抗炎和促再生活性，广义上称为M2型巨噬细胞。除了拮抗M1型反应外，M1向M2表型的转换在促进组织再生和恢复稳态方面也至关重要。M1巨噬细胞主导的异常炎症是多种慢性炎症性疾病（包括动脉粥样硬化、炎症性肠病、哮喘、类风湿性关节炎、骨关节炎、多发性硬化症和慢性静脉性腿部溃疡）的发病机制之一。因此，开发能够减轻急性炎症并促进M2型极化的治疗药物具有重大意义。
巨噬细胞极化在损伤后骨骼肌再生过程中起着核心调控作用。卫星细胞——肌肉中的成体干细胞——被激活后增殖、迁移至损伤部位、融合并分化，形成新的肌纤维。巨噬细胞直接调控卫星细胞的活化和成熟，对肌肉再生至关重要。在人肌肉损伤后，M1型巨噬细胞在体外和体内均可促进卫星细胞及肌源性前体细胞的增殖，而M2型巨噬细胞则促进其分化。巨噬细胞极化失衡，特别是向M1表型偏移，已被证实会抑制骨骼肌修复。向M2表型的转化对于最终获得功能性肌肉至关重要。
本研究的核心假说是：IL-4偶联的金纳米颗粒（AuNPs）能够引导巨噬细胞向M2a型极化，从而增强缺血性损伤后功能性骨骼肌的再生能力。IL-4是一种抗炎细胞因子，可诱导M1型巨噬细胞向M2a状态极化。外源性IL-4足以通过自我更新驱动M2型巨噬细胞的积累，这表明递送IL-4可在无需进一步招募具有破坏性的M1型巨噬细胞的情况下，诱导治疗性M2型巨噬细胞的扩增。IL-4已在多种炎症性疾病模型（包括自身免疫性脱髓鞘疾病、关节炎和慢性皮肤炎症）中被广泛探索作为潜在治疗药物。然而，由于其在体内半衰期短，其应用需要反复输注，由此产生的高剂量需求和系统性副作用限制了IL-4治疗的应用。在本研究中，我们利用纳米颗粒（NPs） 进行IL-4递送，因为与一次性注射给药相比，纳米颗粒能够在靶组织内实现广泛分布并延长保留时间。我们特别选用金纳米颗粒，是因为它们可以在临床相关尺寸范围内合成单分散粒径，可注射使用，并且在人体中表现出极低的毒性或免疫原性。金的制剂已获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准用于治疗关节炎——一种慢性炎症性疾病。
小鼠造模：
选用雌性C57BL/6J小鼠（6–8周龄），通过左侧单侧股动脉及股静脉结扎术诱导后肢缺血模型。
氯膦酸盐脂质体ClodronateLiposomes清除骨骼肌肌肉巨噬细胞清除方案：
通过结扎股动脉/静脉，对C57BL6/J小鼠的左侧胫骨前肌（TA）施加缺血性损伤。为了耗竭单核细胞/巨噬细胞，从手术前2天开始，对小鼠给予荷兰Liposoma氯膦酸盐（clodronate）或作为对照的PBS脂质体（Liposoma）处理。
给药时间线：
巨噬细胞耗竭实验方案
氯膦酸盐脂质体（Clodronate liposomes）及PBS脂质体均购自Liposoma公司。具体给药方案如下：
● 静脉注射（眼眶后注射）：于手术前2天给予70 μL脂质体进行眼眶后静脉注射；此后，分别于术后第1天及第5天再次给予相同剂量（70 μL）的注射（具体流程见图S1A）。
● 局部肌肉注射（胫骨前肌内注射）：于手术前1天，向缺血侧胫骨前肌（TA）肌内注射10 μL脂质体；此后，分别于术后第2天及第7天再次进行同样剂量（10 μL）的局部注射。
论文信息：
论文题目：Functional muscle recovery with nanoparticle-directed M2 macrophage polarization in mice
期刊名称：PNAS
时间期卷：115 (42) 10648-10653
DOI: 10.1073/pnas.1806908115
产品信息：
货号：CP-010-010
规格：10ml+10ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes&Control Liposomes
办事处：靶点科技
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体清除肌肉巨噬细胞。荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂ClodronateLiposomes见刊于PNAS：通过纳米颗粒引导M2型巨噬细胞极化实现小鼠功能性肌肉恢复。
Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes氯膦酸二钠脂质体清除巨噬细胞的材料和方法：
In vivo macrophage depletion
Macrophage Depletion. Clodronate and PBS liposomes were purchased from Liposoma (SKU: LIP-01). Liposomes (70uL) were administered retro-orbitally 2 days before surgery, and again on days 1 and 5 after surgery (Fig. S1A); 10uL were also administered intramuscularly into the ischemic TA 1 day before surgery, and again on days 2 and 7 after surgery.
巨噬细胞清除材料和方法文献截图：
