更新时间:2024-08-07
Click Chemistry Tools生产的链霉亲和素磁珠具有市场上ZUI高的生物素结合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的结合力可减少固定生物素化样品所需的珠子质量,并降低非特异性结合的背景噪音,从而产生更好的信号并降低净成本。 珠的直径为1.0 µm,每毫克珠至少结合12 nmol的游离生物素。 磁珠还具有出色的磁性,可使用各种磁力架快速有效地捕获。
链亲和素磁珠streptavidin magnetic beads
Click Chemistry Tools manufactures Streptavidin Magnetic Beads with one of the highest biotin binding capacities on the market (>12 nmol of biotin per mg). Higher binding translates into reduced bead mass required to immobilize a biotinylated sample and lower background noise from nonspecific binding, resulting in better signals and lower net costs. The beads are 1.0 µm in diameter and bind at least 12 nmol of free biotin per milligram of beads. The beads also have excellent magnetic properties for rapid and efficient capture using a variety of magnetic stands.
Click Chemistry Tools生产的链霉亲和素磁珠具有市场上ZUI高的生物素结合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的结合力可减少固定生物素化样品所需的珠子质量,并降低非特异性结合的背景噪音,从而产生更好的信号并降低净成本。 珠的直径为1.0 µm,每毫克珠至少结合12 nmol的游离生物素。 磁珠还具有出色的磁性,可使用各种磁力架快速有效地捕获。
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Click chemistry tools是一家专业生产荧光叠氮化物探针,代谢标记试剂;化学辅助试剂,生物素/链霉抗生物素蛋白的富集试剂,其产品远销国内外,欢迎咨询。
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链亲和素磁珠streptavidin magnetic beads
Alkyne-PEG4-Acid | TA102-100 | 100 mg | $195 | click chemistry tools |
Cy5 NHS Ester | 1076-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Cy7 NHS Ester | 1115-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 405 Labeling Kit | 1313 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 546 Labeling Kit | 1316 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 647 Labeling Kit | 1320 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
产品介绍:clickchemistrytools
点击化学(Click chemistry)—蛋白质组学研究和新药研发的理想技术。美国一家小众里生物公司,国内通常称呼为CCT,生产有浓缩介质,代谢标记试剂,生物素标记试剂,荧光染料以及交联剂.
“点击化学"( “click chemistry")是2001年美国诺贝尔化学奖获得者、史格堡研究院(Skaggs institute)化学生物研究所的研究员贝瑞夏普利斯(K. Barry Sharpless)发展出一种新技术,其所具有的高效和高控制性,在化学合成领域掀起了一场风暴,成为目前医药领域吸引人的发展方向,被业界认为是未来加快新药研发有效的技术之一。“点击化学"的基本思想就是利用碳-杂原子成键反应快速实现分子多样性,一般由叠氮化物(azide)和炔烃(alkyne)作用形共价键,具有高效稳定,高特异性等优点。反应不受PH影响,能在常温条件下的水中进行,甚至能在活细胞中进行
原理介绍:
1.链霉/亲和素
亲和素主要包括卵白亲和素、链亲和素、卵黄亲和素及类亲和素等。后两种因其特异性亲和力低,研究不多,前两种目前已深入研究并得到广泛应用。
亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,pI 10~10.5;在pH9~13缓冲液中性质均稳定,耐热并耐多种蛋白水解酶的作用。天然亲和素为碱性蛋白,由4个相同的亚单位构成4聚体;每个亲和素亚单位通过其结构中的色氨酸残基与生物素中的Ureido环(I环)结合。因此,1个亲和素分子存在4个与生物素分子结合位点,其结合常数(Ka)高 达1015mol/L。
链霉亲和素(SA)是与亲和素(A)有类似生物学特性的一种蛋白质。是由Streptomyces avidin菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物,SA也可通过基因工程手段生产。SA分子量为65000,由4条序列相同的肽链构成,每条SA肽链可以结合1个生物素分子。因此与A一样,每个SA分子也具有4个可与生物素分子结合位点,其结合常数与A相同为1015mol/L。约为抗原抗体间ka(105~1011 mol/L)的1万倍以上。
SA与A的ka虽然相同,但在实际应用中其检测灵敏度明显优于A,其原因是SA为 略偏酸性的蛋白。SA的每条肽链含159个氨基酸残基,其中赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的含量比一般亲合素少,反之含酸性氨基酸较多,其等点为6.0,较A(pI=10)为低,同时在结构中SA不含任何糖基,而A含糖可高达10%。A的高pI及高含糖结构导致在聚苯乙烯板和硝酸纤维素膜上或与组织细胞DNA结合时,易产生一定程度的非特异性结合,造成较高的显色背景,而SA较A在应用中明显克服了这一缺点。
SA的活性可达18u,较A高(15u);与A一样,每个SA分子也具有4个可与生物素分子结合位点,故其效应相同。
2.生物素
生物素(Biotin)为B族维生素之一,又称维生素H、维生素B7、辅酶R(Coenzyme R)等。是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。生物素是水溶性维生素B群成员。
生物素(biotin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.biotin31Da.生物素分子有两个环状结构(如图),其中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素结合的主要部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链,其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的结构,经化学修饰后,生物素可成为带有多种活性基团的衍生物--活化生物素。活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联,包括蛋白质,核酸,多糖,脂类等。
3.链亲和素-生物素系统
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin-System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。近年大量研究证实,生物素-亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。它已成为目前广泛用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究的新技术。
原理示意图
BAS在实际应用中所具有的巨大*性,主要表现在以下几个方面。
生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。
亲和素与生物素间的结合具有*的亲和力,其反应呈高度专一性。因此,BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时,并不增加非特异性干扰。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可大限度地降低反应试剂的非特异作用。
亲和素结合生物素的亲和常数可为抗原-抗体反应的百万倍,二者结合形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此,BAS在实际应用中,产物的稳定性高,从而可降低操作误差,提高测定的精确度。
生物素-亲和素系统的多功能性还能提供一套统一的研究方法。例如对于某待测分子,已经得到了对于该分子的生物素标记抗原,那么配合结合亲和素的胶体金可以在电镜下观测,配合结合荧光标记的亲和素可以使用流式细胞仪筛选,配合连接到酶的亲和素可以进行ELISA等免疫组化实验。
BAS可依据具体实验方法要求制成多种通用性试剂(如生物素化第二抗体等)适用于不同的反应体系,而且都可高度稀释,用量很少,实验成本低;尤其是BAS与成本高昂的抗原特异性抗体偶联使用,可使后者的用量大幅度减少,节约实验费用.此外,由于生物素与亲和素的结合具高速、高效的特性,尽管BAS的反应层次较多,但所需的温育时间不长,实验往往只需数小时即可完成