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悬浮细胞做好免疫荧光的关键步骤

发布时间:2023-02-17   点击次数:1513次

您是否希望悬浮细胞的免疫荧光像贴壁细胞一样容易?现在就是这样!

靶点科技Shi-fix玻片允许悬浮细胞分层或直接作为单层生长。简单,无忧的实验方案,无需离心即可将悬浮细胞固定到载玻片上。只需将细胞添加到载玻片上,等待30分钟,用PBS洗涤未结合的细胞并继续免疫染色(或继续培养以获得所需的细胞密度)。

这些玻片也可用于染色悬浮细胞以进行显微镜检查,或用于固定悬浮细胞以进行共聚焦显微镜检查。更重要的是,如果需要,您还可以在细胞附着在玻片上时刺激它们。您可以像贴壁细胞一样处理非贴壁细胞!

关键步骤:

1. 使用PBS清洗细胞,并将细胞重新悬浮于PBS中(2-5 百万个/ml)

2. 把悬浮细胞专用免疫荧光玻片放置于12孔或者6孔细胞培养板孔里,直接滴加细胞于悬浮细胞专用免疫荧光玻片上(每个玻片上20-30万个细胞)

3. 使细胞附着30分钟,有些细胞需要延长附着时间,但不要超过1小时。使用约2ml PBS冲洗掉未结合细胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上细胞,可将PBS滴加于板孔里侧边,然后轻轻摇晃3-5分钟)

4. 在显微镜下检查细胞附着情况,如果需要进一步培养,那么加入1ml培养基即可;若不培养即可直接固定,染色。


四步走,操作示意图如下:





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