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Treg cell induction after depletion of platelets Emfret货号R300 in vivo

更新时间:2024-03-23   点击次数:148次

Abstract

Platelets are a rich source of many cytokines and chemokines including transforming growth factor β 1 (TGF-β1). TGF-β1 is required to convert conventional CD4+ T (Tconv) cells into induced regulatory T (iTreg) cells that express the transcription factor Foxp3. Whether platelet contents will affect Treg cell properties has not been explored. In this study, we show that unfractionated platelet lysates (pltLys) containing TGF-β1 efficiently induced Foxp3 expression in Tconv cells. The common Treg cell surface phenotype and in vitro suppressive activity of unfractionated pltLys-iTreg cells were similar to those of iTreg cells generated using purified TGF-β1 (purTGFβ-iTreg) cells. However, there were substantial differences in gene expression between pltLys-iTreg and purTGFβ-iTreg cells, especially in granzyme B, interferon γ, and interleukin-2 (a 30.99-, 29.18-, and 17.94-fold difference, respectively) as determined by gene microarray analysis. In line with these gene signatures, we found that pltLys-iTreg cells improved cell recovery after transfer and immune suppressive function compared with purTGFβ-iTreg cells in factor VIII (FVIII)–deficient (F8null, hemophilia A model) mice after recombinant human FVIII (rhF8) infusion. Acute antibody-mediated platelet destruction in F8null mice followed by rhF8 infusion increased the number of Treg cells and suppressed the antibody response to rhF8. Consistent with these data, ex vivo proliferation of F8-specific Treg cells from platelet-depleted animals increased when restimulated with rhF8. Together, our data suggest that pltLys-iTreg cells may have advantages in emerging clinical applications and that platelet contents impact the properties of iTreg cells induced by TGF-β1.

摘要

血小板是许多细胞因子和趋化因子的丰富来源,包括转化生长因子 β 1 (TGF-β1)。TGF-β1 是将常规 CD4+ T (Tconv) 细胞转化为表达转录因子 Foxp3 的诱导调节性 T (iTreg) 细胞所必需的。血小板内容物是否会影响Treg细胞特性尚未得到探索。在这项研究中,我们发现含有 TGF-β1 的普通血小板裂解物 (pltLys) 有效地诱导了 Tconv 细胞中 Foxp3 的表达。普通 pltLys-iTreg 细胞的常见 Treg 细胞表面表型和体外抑制活性与纯化 TGF-β1 (purTGFβ-iTreg) 细胞生成的 iTreg 细胞相似。然而,通过基因微阵列分析确定,pltLys-iTreg 和 purTGFβ-iTreg 细胞之间的基因表达存在显着差异,尤其是在颗粒酶 B、干扰素 γ 和白细胞介素-2 中(分别相差 30.99 倍、29.18 倍和 17.94 倍)。根据这些基因特征,我们发现在重组人FVIII(rhF8)输注后,与凝血因子VIII(FVIII)缺陷(F8null,血友病A模型)小鼠中的purTGFβ-iTreg细胞相比,pltLys-iTreg细胞改善了转移后的细胞恢复和免疫抑制功能。在F8null小鼠中,急性抗体介导的血小板破坏,然后输注rhF8,增加了Treg细胞的数量,并抑制了对rhF8的抗体反应。与这些数据一致,当用rhF8重新刺激时,来自血小板耗尽动物的F8特异性Treg细胞的离体增殖增加。总之,我们的数据表明,pltLys-iTreg细胞可能在新兴的临床应用中具有优势,并且血小板含量会影响TGF-β1诱导的iTreg细胞的性质。


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数据图片:

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原始论文:

1. TGF-β1 along with other platelet contents augments Treg cells to suppress anti-FVIII immune responses in hemophilia A mice.


背景介绍:

除了在止血中的基本作用外,血小板还调节先天性和适应性免疫反应.1-6 其免疫调节活性的基础机制尚不清楚。血小板分泌

颗粒含有多种介导生理和病理过程的生物活性蛋白.7,8 每天大约有 1011 个新产生的血小板进入血液,取代那些老化或被破坏的

血小板。9-11 吞噬细胞清除凋亡血小板通过产生调节性细胞因子(包括转化生长因子 β 1 (TGF-β1) 和白细胞介素-10

(IL-10))来产生免疫调节微环境,它们支持调节性 T (Treg) 细胞的发育和功能12-15。

在之前的研究中,我们证明了血小板中因子 VIII (FVIII) 或 FIX 的异位表达导致血小板 α 颗粒中 FVIII 或 FIX 的储存,并诱导

血友病小鼠的抗原特异性免疫耐受.16-20 尽管介导血小板基因治疗后免疫耐受的确切机制尚不清楚,但该过程可能是血小板内

容物所固有的, 因为血小板α颗粒也含有丰富的TGF-β1。事实上,TGF-β1在体内的来源是血小板.21血小板来源的TGF-β1

(pltTGFβ)在支持免疫耐受方面的生理相关性尚不清楚,并且由于储存在血小板颗粒中的其他丰富的细胞因子和趋化因子

而变得复杂5,22。

pltTGFβ、其他血小板内容物和 Treg 细胞的特性之间可能存在重要联系。我们假设 pltTGFβ 可以诱导常规 T (Tconv) 细胞成

为功能诱导调节性 T (iTreg) 细胞,并且血小板中的其他内容会影响 pltTGFβ 诱导的 Treg 细胞的性质。在这项研究中,我们

检查了血小板裂解物 (pltLys) 在体外驱动 iTreg 细胞分化的能力。我们分析了 pltLys 产生的 iTreg 细胞的基因特征、Foxp3

表达的稳定性和抑制功能。我们还研究了血小板和Treg细胞的体内相关性以及它们在血友病A(FVIII缺陷,F8null)小鼠中对重

组FVIII(rhF8)输注的反应中的免疫抑制功能。我们的数据显示,pltTGFβ与其他血小板内容物一起在改变Treg细胞的基因表

达特征、促进Treg细胞稳定性和增强抗原特异性Treg细胞抑制功能方面发挥重要作用。



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