冷冻保存哺乳动物细胞在生物学研究中非常有价值和普遍。为了防止技术原因(培养操作)使细胞污染或物理原因(培养箱故障)使长期培养功亏一篑。此外,长期多次的培养和传代,导致细胞在遗传学性状上的老化和分化都是促使在接收或生成新细胞系后首要考虑的适宜策略就是冻存细胞。低温冻存对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。细胞深低混保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0℃到-20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,冰晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。
如何减少或者避免冰晶形成,如同冻存细菌时用的甘油,DMSO(二甲基亚砜)是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损書,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。冻存液中加入后可以使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内的水分逐渐透出,从而减少了冰晶的形成,从而避免细胞的损伤。这就是为什么低温冻存细胞时为什么要采用慢冻的一个重要原因。
一旦从生长培养基转移到冷冻培养基中,就要执行慢冻的过程。尽管冷冻细胞系是通常执行的程序,但是当没有合适的冷冻器县时,或者由于存在血清,额外洗涤或操作不当时,就会出现问题。当然,这个问题是在细胞复苏(快融)后才发现的,发现复苏后的细胞大部分感者全部都是死细胞,甚至还有不容易发现的整个冻存过程的不当导致的细胞分化。
针对上述细胞冻存过程中的痛点,今天我们带来NIPPON Genetics品牌的一款认可的BambankerTM无血清细胞冻存液。BambankerTM细胞冻存液允许直接将细胞在-80℃或液氮中冷冻保存,从而避免了对额外设备的需求,并且也避免了耗时且复杂的梯度逐渐冷冻方案。
同时,Bambanker是一款无血清、无动物源且成分明确的即用型细胞冻存液,适用几乎所有类型细胞株,包括原代细胞、干细胞、淋巴细胞以及常规细胞系等,该产品已在上百篇同行评审出版物中被引用,获得全球用户的认可。目前,JCRB细胞库用Bambanker冻存超过1400种不同细胞系,冻存超过5年后的细胞复苏活率仍可达到80%以上。相比于传统添加血清的细胞冻存方法,用Bambanker冻存细胞有很大的优势。
BambankerTM无血清细胞冻存液特点:
Bambanker冻存液采用无动物源配方,成分明确,避免支原体、病毒等不确定来源成分的污染
能满足细胞在-80°C 或-196°C低温条件下长期稳定保存
Bambanker为即用型细胞冻存液,无需稀释、无需程序降温步骤
Bambanker能有效提高复苏后的细胞活率
GMP生产标准
适用于所有细胞系
产品效期长,在2-10℃可保存2年
Bambanker冻存液的使用方法也非常简单,如下图所示,无需程序降温步骤,满足细胞在-80℃条件下长时间稳定保存。
BambankerTM相较于含血清冻存液的优势:
所有BambankerTM产品均不含血清。含有血清的冷冻保存培养基具有回收率波动和成分不确定的缺点。冻存于含血清的培养基中的细胞的实验可重复性可能会受到批次之间血清差异的影响,因为蛋白质和其他生物分子的组成和浓度会随每批血清而变化。解冻和使用这种含血清培养基的细胞时,可能会导致问题。因为Bambanker"的每种成分都经过仔细定义,因此您可以放心,在不同时间存储的细胞都将有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化:
不期望的细胞分化也可能是冷冻细胞长期保存的一个问题。 所有Bambanker试剂均旨在尽可能地减少此问题。 对于特别麻烦的细胞,Bambanker不含DMSO的配方经过特殊配制,可防止可能与含DMSO的冷冻保存试剂相关的问题。因此,请加入越来越多的实验室的选择,使用Bambanker保护其细胞系!
BambankerTM无血清细胞冻存液家族:
BambankerTM引用文献(部分):
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2. S. Mieno et al., Characteristics and function of cryopreserved bone marrow-derived endothelial progenitor cells. The Annals of thoracic surgery85, 1361 (Apr, 2008).
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6. S. Mieno et al., Effects of diabetes mellitus on VEGF-induced proliferation response in bone marrow derived endothelial progenitor cells. Journal of cardiac surgery25, 618 (Sep, 2010).
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作为NIPPON Genetics在中国的区域总代理,靶点科技将为中国客户提供全面的NIPPON Genetics的产品。