主要有两种基本的细胞培养体系,一种是使细胞在人工基质上单层生长(如贴壁培养),另一种是使细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。
每种培养类型的特征
除造血细胞系和其他一些细胞外,大多数脊椎动物细胞均具有贴壁依赖性,必须在合适的基质上培养,且该基质必须经过特殊处理,以便细胞附着和铺展(即经组织培养处理)。然而,许多细胞系也可采用悬浮培养。同样,大多数市售昆虫细胞系在单层或悬浮培养中生长良好。
悬浮培养细胞可在未经组织培养处理的培养瓶中培养,但随着培养物体积与表面积之比(通常为0.2 – 0.5 mL/cm2)的增加,阻碍了气体的充分交换,因此需要对培养基进行搅拌。这种搅拌一般通过磁力搅拌器或旋转转瓶实现。
贴壁细胞培养 | 悬浮细胞培养 |
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适用于大多数细胞类型,包括原代培养 | 适用于适应悬浮培养的细胞和一些其他非粘附性细胞系(例如,造血细胞细胞系) |
需要定期传代,但可在倒置显微镜下轻松进行目视检查 | 更容易传代,但需要每日进行细胞计数和存活率测定以遵循生长模式;可稀释培养物以刺激生长 |
通过酶解(例如,Gibco™ TrypLE™ Express、胰蛋白酶)或机械解离细胞 | 不需要酶或机械解离 |
生长受表面积的限制,可能会限制产品产量 | 生长受培养基中的细胞浓度限制,便于扩大规模 |
需要经组织培养处理的容器 | 可在未经组织培养处理的培养容器中维持培养,但需要搅拌(即振荡或搅拌),以实现充分的气体交换 |
用于细胞学、持续收获产品和多种研究应用 | 用于大量蛋白生产、批量收获和多种研究应用 |
悬浮细胞如何能像贴壁细胞一样?好固定能便于后续实验操作,比如免疫荧光。解决掉片的痛点就是使用ShiFix悬浮细胞免疫荧光专用玻片,就四步,搞定掉片难题。