肝纤维化是一种慢性肝病在修复过程中的病理状态,其中慢性肝病包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、胆汁淤积性肝炎以及某些代谢性疾病等。研究表明,肝纤维化作为所有慢性肝病的共同病理阶段,是肝硬化甚至肝癌发展的必经阶段。大量研究证明,适当的治疗措施可逆转肝纤维化和早期肝硬化病理状态,控制肝纤维化的发展对于肝硬化甚至肝癌的防治具有至关重要的作用。因此,逆转肝纤维化的治疗成为众多慢性肝脏疾病治疗的汇聚点。
慢性肝损伤暴露于纤维化,其终末期肝硬化与危及生命的并发症有关。尽管肝硬化长期以来一直被认为是不可逆的,但来自慢性肝病患者和小鼠模型的数据已经明确表明,在消除根本原因后,纤维化甚至可以在后期恢复。然而,在许多情况下,这一目标无法实现,这凸显了对阻止进展和/或促进已建立的纤维化/肝硬化的消退的治疗的迫切未满足需求。去除或消除病原体可促进炎症和促纤维化反应的抑制,以及纤维化细胞的失活和/或消失,导致肝纤维化的消退。在免疫细胞中,肝巨噬细胞的不同亚群在控制纤维化进展和消退中起着双重作用。特别是,来自人类样本和实验小鼠模型的数据表明,在肝损伤期间,具有高表达 Ly6C 的募集单核细胞衍生巨噬细胞 (MoMac) 分泌促炎和促纤维化细胞因子,从而延续纤维化反应。相比之下,小鼠模型研究表明,在纤维化消退期间,具有 Ly6Clo 表型的恢复性 MoMac 群体会促进疤痕退化。因此,控制促纤维化与恢复性巨噬细胞平衡被认为是促进纤维化消退的有吸引力的策略。
四氯化碳法诱导肝纤维化模型的原理属于氧化应激反应,机制是四氯化碳在肝脏内代谢生成三氯甲基自由基,产生的自由基诱发脂质过氧化反应,生成的过氧化物包括丙二醛和4-羟基壬烯酸,它们以线粒体为靶点,破坏线粒体膜结构,从而损伤肝细胞膜,激活肝星状细胞(hepaticstellatecell,HSC)释放Ⅰ型胶原酶和Ⅳ型胶原酶,促进HSC增生,导致肝纤维化。
对于慢性模型,持续时间比较长,如何在合适的时间点使用荷兰Liposoma的巨噬细胞清除剂Clodronateliposomes氯膦酸盐脂质体清除单核巨噬细胞就显得很关键,相对于试剂成本,慢性模型的时间成本更可贵。如何参考相关的文献,就很迫切。Nature Communications的MAIT cell inhibition promotes liver fibrosis regression via macrophage phenotype reprogramming的文献值得参考。
首先,作者做出来单核巨噬细胞在模型里面的动态曲线。
其次,以四氯化碳模型为基础,联合研究的目的分子,设计合适的注射Clodronateliposomes的timeline。
最后,为了增加实验结果的公信力,作者使用了荷兰Liposoma的巨噬细胞清除试剂(货号CP-005-005)。静脉注射,剂量10ul/g体重。
荷兰Liposoma的Clodronateliposomes氯膦酸盐脂质体巨噬细胞清除试剂(货号CP-005-005)产品图片。