附睾白色脂肪组织 （eWAT）巨噬细胞在高脂诱导肥胖模型氯膦酸二钠脂质体清除解决方案

在对瘦和肥胖小鼠的附睾白色脂肪组织 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 进行表达芯片分析时，spp1（分泌的磷蛋白 1 或骨桥蛋白，OPN）是饲喂高脂饮食 （HFD） 12 周的小鼠中上调最高的基因（~28 倍）。OPN 增加介导 ATM 向 eWAT15 的募集。OPN 主要由成骨细胞和骨细胞分泌，是骨骼细胞外基质中丰富的非胶原磷蛋白。它用于调节基质矿化和骨细胞（骨细胞和破骨细胞）附着。OPN 高度集中在骨水泥线上，其中残留和新形成的骨在骨细胞和底层破骨细胞周围的限制层结构（细胞-基质相互作用）的骨表面整合（矿物-基质相互作用）。

在高脂饮食 （high-fat diet：HFD） 诱导的肥胖中，附睾白色脂肪组织 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 分泌一系列细胞因子来调节器官和组织的代谢，但其对骨代谢的影响尚不清楚。在这里，我们报道了 eWAT 中的巨噬细胞是骨桥蛋白的主要来源，骨桥蛋白选择性地循环到骨髓并通过激活破骨细胞来促进骨基质的降解，以及调节骨髓衍生的巨噬细胞 （BMDM） 以吞噬小鼠骨髓中脂肪细胞释放的脂滴。然而，骨桥蛋白调节诱导的乳酸积累通过限制溶酶体中 ATP6V0d2 的能量再生来阻断 BMDMs 中的脂肪分解和破骨细胞生成。手术切除 eWAT 和局部注射氯膦酸盐脂质体 （用于清除巨噬细胞） 或骨桥蛋白中和抗体均显示出对 HFD 诱导的小鼠骨质流失的改善。这些结果为开发缓解肥胖相关骨骼疾病的治疗策略提供了一条途径。

研究背景：分别选取高脂饮食组 (HFD)和正常饮食组（NFD）的小鼠附睾白色脂肪组织 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）。巨噬细胞是eWAT中的主要免疫细胞，基于基因表达，巨噬细胞可进一步分为：血管周样巨噬细胞(C1, PVM)，非血管周样巨噬细胞(C3, NPVM)，脂质相关巨噬细胞(LAM, C2)，proliferative LAM (C5, P-LAM)，胶原表达巨噬细胞(C4, CEM)和调节性巨噬细胞(C6, RM)。与对照组相比，高脂饮食诱导的肥胖导致LAMs和P-LAMs数量急剧增加，NPVMs和PVMs数量显著降低。荷兰liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes经过全球客户的大量实验验证，塔尖客户的选择，顶刊Cell，Nature和Science的发表，正所谓Proven and published^®。附睾白色脂肪组织 （eWAT）巨噬细胞在模型中的增多，同时骨桥蛋白的共定位，表达增加，骨质情况的变化三者的关系研究期待跃然纸上。附睾白色脂肪组织 （eWAT）巨噬细胞在高脂诱导肥胖模型氯膦酸二钠脂质体清除解决方案，使用荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂：Clodronnate Liposomes氯膦酸二钠脂质体（CP-005-005）来清除巨噬细胞。论文信息和实验数据如下。

论文信息：

论文题目：Macrophages in epididymal adipose tissue secrete osteopontin to regulate bone homeostasis

期刊名称：Nature Communications

时间期卷：13, Article number: 427 (2022)

在线时间：2022年1月20日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-021-27683-w

产品信息：

货号：CP-005-005

规格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

产地：荷兰

名称：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

办事处：Target Technology（靶点科技）

氯膦酸盐脂质体清除附睾脂肪组织中的巨噬细胞，其分泌骨桥蛋白以调节骨稳态。氯膦酸盐二钠脂质体清除巨噬细胞在高脂诱导的肥胖（HFD）模型附睾脂肪组织和破骨细胞功能研究，荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes见刊于Nature Communications：

F4/80+ and CD11b+ macrophages in eWAT secrete OPN

Obesity induces macrophages to infiltrate the CLSs of eWAT, and the presence of these ATMs is closely correlated with lipid turnover and chronic systemic inflammation. It was unknown whether inhibition of these actions by depleting ATMs would be able to restore bone marrow homeostasis. After injection of clodronate liposomes (CL, 0.675 mg/unilateral/3 days, to clear the ATMs) into the bilateral eWAT for 8 weeks, infiltration of ATMs was significantly lower in the HFD-fed mice (HFD + CL) than the HFD-fed mice treated with control liposomes (HFD + Ctrl) (Fig. 4a, b). The progression of bone loss was attenuated, and rBMAT mass significantly decreased in the HFD + CL group compared with the HFD + Ctrl group (Fig. 4c–e). Together, these results suggest that obesity activates the ATMs of eWAT to influence bone marrow metabolism.

ATM(adipose tissue-derived macrophages： ATMs)depletion

The abdominal hair was shaved, and the skin was treated with betadine. ATMs were depleted by injecting clodronate liposomes (0.675 mg/unilateral/3 days, LIPOSOMA, Lot # C10E0218) into the bilateral eWAT under inhalation isoflurane without surgical incision every 3 days from 12 weeks of age. Mice were simultaneously fed an NFD or HFD for 8 weeks. The control group mice received the control liposome (LIPOSOMA, Lot# C14E0218).

注射方式：局部注射，注射到双侧附睾白色脂肪组织 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）

注射频频：3天一次

注射剂量：0.675mg。clodronate Liposomes试剂浓度是5mg/ml。也是单侧注射135ul。