肝肝门静脉（iPo）注射胰腺导管腺癌（PDAC）肿瘤细胞来模拟肝转移。选择这种方法，因为转移是胰腺导管腺癌（PDAC）的早期事件，通过这个模型，可以研究巨噬细胞在肝脏转移级联早期（播种阶段）和晚期（生长阶段）中的作用。
肝脏巨噬细胞在转移播种过程中有什么作用呢？为了清除巨噬细胞，我们使用了荷兰Liposoma厂家的包裹有氯膦酸的脂质体ClodronateLiposomes（CEL），在转移挑战之前给药。包裹有氯膦酸的脂质体ClodronateLiposomes（CEL）清除了肝脏中的库普弗细胞（KCs）和骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）（图3b-d）。然而，巨噬细胞的清除对转移播种没有影响。我们还测试了KCs在转移播种中的具体作用。为此，我们向Clec4f-cre-tdTomato /-Rosa26-LSL-DTR /-（Clec4fDTR）小鼠注射了白喉毒素（DT）。同样，KC的消耗对转移播种也没有影响。因此，该模型肝脏中的肿瘤细胞转移播种可以独立于巨噬细胞发生。
为研究肿瘤细胞与不同肝脏巨噬细胞亚群之间的细胞-细胞相互作用。我们对正常小鼠的肝脏进行了单细胞RNA测序，并确定Clec4f作为一个差异表达基因，能够区分肝脏常驻的Kupffer细胞（KCs）和骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）（下图a–d），与先前的文献一致。基于这一发现，我们使用Clec4f作为KC特异性标记，利用多重免疫组化（mIHC）研究肿瘤细胞与肝脏巨噬细胞亚群之间的相互作用。种植的肿瘤细胞更常被发现与F4/80 BMDM接触，而不是F4/80 Clec4f KC（下图e–h）。此外，在已建立的转移瘤（扩展阶段）中，BMDMs主要存在于病变内部。相比之下，如预期的那样，居住在肝窦中的KCs仅限于附近的肝脏组织（下图2i–l）。因此，不同谱系的巨噬细胞亚群存在于与转移病灶相关的空间区域，并可能在转移过程中以不同方式与肿瘤相互作用。
巨噬细胞以前被认为在肝脏中的转移中起到支持作用。为了测试巨噬细胞在转移生长阶段的作用，我们在转移种植后应用了荷兰Liposoma厂家的包裹有氯膦酸的脂质体ClodronateLiposomes（CEL）以耗竭肝脏巨噬细胞。在这种情况下，巨噬细胞的耗竭显著减少了肝脏中的肿瘤负担。接下来我们测试了库普弗细胞在调节转移生长中的作用。为此，Clec4fDTR小鼠在肿瘤种植后每天接受DT治疗以耗竭库普弗细胞。在该模型中，库普弗细胞的耗竭并未影响转移负担。综合以上数据，这些结果与肿瘤相关巨噬细胞在支持转移生长中的作用一致，而不是库普弗细胞，这一点之前也曾被提出过。
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体清除肝脏巨噬细胞，疾病模型为：门静脉注射PDACYFP-cells。PDAC是胰腺导管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma）的缩写，属于胰腺癌中常见且恶性程度高的类型，占胰腺恶性肿瘤的85%-90%。它起源于胰腺导管上皮细胞，侵袭性强、进展迅速，多数患者确诊时已处于中晚期，5年生存率不足10%。荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes见刊于Nature Communications：Kupffer 细胞可防止小鼠胰腺导管腺癌转移到肝脏。Clec4f可以区分肝脏巨噬细胞KF和骨髓来源巨噬细胞BMDM吗？详细类容可以见如下文献。
论文信息：
论文题目：Kupffer cells prevent pancreatic ductal adenocarcinoma metastasis to the liver in mice
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：14, Article number: 6330 (2023)
在线时间：2023年10月10日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-023-41771-z
产品信息：
货号：C-010
规格：10ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes
办事处：Target Technology(靶点科技)
