为了证明巨噬细胞在体内控制单纯疱疹病毒1型（HSV-1）感染中的重要性，我们通过静脉注射HSV-1感染了C57BL/6小鼠，然后通过组织学分析病毒在肝脏中的分布。未经处理的小鼠和HSV-1感染的巨噬细胞耗竭小鼠作为对照。感染1小时后，大多数病毒接种体与肝脏内的F4/80巨噬细胞共定位（图1a），表明巨噬细胞能够在全身给药后迅速摄取HSV-1。未经感染的小鼠没有显示HSV-1染色（图1a），而巨噬细胞耗竭小鼠在脾脏和肝脏中没有F4/80阳性细胞，也没有共定位（补充图1）4。为了深入了解巨噬细胞的功能作用，我们用氯膦酸脂质体处理C57BL/6小鼠以耗竭巨噬细胞。对照小鼠接受对照脂质体处理，所有小鼠随后感染HSV-1。在存在巨噬细胞的情况下，感染后24小时HSV-1几乎没有复制（图1b, c）。相比之下，在缺乏巨噬细胞的情况下，HSV-1复制非常迅速（图1b, c）。HSV-1复制增强与巨噬细胞缺乏小鼠肝脏和脾脏中具有感染性的HSV-1产生相关（图1d）。与病毒大量扩散一致，巨噬细胞缺乏小鼠出现肝细胞损伤，并在感染后迅速死亡（图1e, f）。为了分析不同感染途径中巨噬细胞的重要性，我们通过阴道感染小鼠HSV-1，并分析HSV-1的局部复制和感染结局。局部HSV-1复制和感染性颗粒产生在对照小鼠和巨噬细胞耗竭小鼠之间相当（图1g, h）。然而，巨噬细胞耗竭小鼠在阴道感染后死亡，而对照小鼠则得到保护（图1i）。这提示阴道中的巨噬细胞并不能限制早期的局部HSV-1复制，但巨噬细胞对于HSV-1的全身控制至关重要。总之，我们发现巨噬细胞确实在防止全身HSV-1扩散中发挥关键作用。
论文信息：
论文题目：Acid ceramidase of macrophages traps herpes simplex virus in multivesicular bodies and protects from severe disease
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：11, Article number: 1338(2020)
在线时间：2020年3月12日
DOI： doi.org/10.1038/s41467-020-15072-8
产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes& Control Liposomes
办事处：Target Technology(靶点科技)
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体清除病毒模型中巨噬细胞 ，荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂ClodronateLiposomes见刊于Nature Communications：巨噬细胞的酸性神经酰胺酶将单纯疱疹病毒困在多囊泡体中，并防止严重疾病。
Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes氯膦酸二钠脂质体清除肿瘤相关巨噬细胞的材料和方法：
D-erythro-sphingosine (C18, 860490) and D-Galactosyl-β1-1’-N-Nervonoyl-D-erythro-sphingosine (C24:1, β-D-Galactosyl Ceramide, 110759), were obtained from Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA). Glycoceramidase (E9030-100MUN), sphingomyelinase (S8633-25UN), Cy3-linked DBCO (777366-1 mg) and DAPI (D9542) were purchased from Millipore Sigma (Darmstadt, Germany). Recombinant mouse Asah2 (3558-AH) was purchased from R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). The sphingosine kinase inhibitor SKI-II (CAS # 312636-16-1; Cat # 2097) was obtained from Tocris Bioscience (Bristol, United Kingdom) and tamoxifen (CAS # 10540-29-1, Cat # T5648-5G) and cornoil (CAS # 8001-30-7, Cat # C8267-500ML) from Millipore Sigma. Clodronate and control liposomes were purchased from Liposoma (CP-005-005, Amsterdam, Netherlands). Clickable ω-azido-sphingosine ((2S,3R,E)-2-amino-18-azidooctadec-4-ene-1,3-diol) for click chemistry42 staining was synthesized in-house by Julian Fink.
Depletion of macrophages
For macrophage-depleted mouse experiments, mice were treated intravenously with 50 mg/kg clodronate to deplete tissue resident macrophages. After 3 days, mice were ready to be used in experiments.
材料和方法文献截图：
