Clodronate liposomes 由包封在磷脂双分子层脂质体内的氯磷酸盐组成,可以被巨噬细胞选择性摄取。在巨噬细胞溶酶体内,磷酸酶逐步释放脂质体内的氯磷酸盐,使其在细胞内累积。当达到阈值浓度时,该累积会导致巨噬细胞不可逆损伤并诱导凋亡,使 clodronate liposomes 成为研究巨噬细胞清除及免疫调控研究的重要工具。
肝脏巨噬细胞,除了耳熟能详的定居的Kupffer细胞(还可以细分到KC1和KC2),还有肝被膜巨噬细胞( LCMs )和肝脏汇管区巨噬细胞(Liver Portal Area Macrophages, LPAM),以及基于肝小叶空间分布中心静脉区(pericentral vein:CV)巨噬细胞和门静脉区(periportal vein:PV)巨噬细胞。
Kupffer细胞(又称库普弗细胞或枯否细胞)是肝脏中定居的巨噬细胞,属于单核吞噬细胞系统的重要组成部分。肝脏巨噬细胞约占全身巨噬细胞总数的80%-90%。它们主要定居于肝血窦内皮细胞之间,是肝脏免疫防御的核心力量,在清除病原体、维持内环境稳定和调节免疫反应中发挥关键作用。
肝脏巨噬细胞功能:
- 吞噬清除作用:Kupffer细胞具有强大的吞噬能力,能非特异性地清除血液中的细菌、病毒、内毒素、衰老红细胞、细胞碎片及免疫复合物等有害物质,是机体抵御血源性感染的首道防线。例如,来自肠道的细菌及其毒素经门静脉进入肝脏后,主要由Kupffer细胞识别并清除。
-免疫调节与炎症调控:在特定环境刺激下,Kupffer细胞可被激活为M1或M2亚型。M1型促进炎症反应,清除病原体,抑制肿瘤生长;M2型则抑制炎症,促进组织修复,但也可能被肿瘤“策反"以支持其生长。
-参与代谢与组织稳态:红细胞被Kupffer细胞吞噬后,血红素被分解,铁离子被回收利用,胆红素则转运至肝细胞结合后排泄,参与铁代谢和胆色素循环。同时,它还合成补体、干扰素等生物活性物质,影响肝细胞蛋白合成与增殖。
-疾病进展中的双重角色:肝炎、酒精性/非酒精性脂肪肝,肝纤维化与肝硬化,肝癌等疾病的发生发展的不同阶段,起到正向或者反向的角色功能。
如何使用Target Technology的巨噬细胞清除剂Clodronate liposomes氯膦酸盐脂质体清除肝脏巨噬细胞?可以参考如下文献。
文献题目:Roquin-1 Regulates Macrophage Immune Response and Participates in Hepatic Ischemia-Reperfusion Injury
动物品系:6-8周雄性C57BL/6c小鼠
给药方法:腹腔注射,400ul/小鼠,5mg/ml浓度
文献截图:

清除数据:

腹腔注射400ul Clodronate Liposomes后,48h取样检测,相对于对照组,IHC和FC检测,Clodronate Liposomes清除了90%以上F4/80阳性巨噬细胞。
原文描述:
Depletion of resident peritoneal mø and Kupffer cells by cloronate liposomes
Mice were injected i.p. with clodronate liposomes (400 μl/mouse). To avoid infection of clodronate liposome-treated mice with commensal bacteria, mice were then fed with drinking water containing ampicillin (1 mg/ml) until sacrifice. Depletion of resident peritoneal mø and Kupffer cells were verified by using flow cytometry and immunohistochemistry, respectively, 48 h after injection (Supplemental Fig. 1A, 1B).
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