糖尿病（DM）是一类高发且致残性代谢疾病，常伴随严重血管病变，包括脑卒中、视网膜病变以及脑微出血（CMBs）。脑微出血是大脑皮质毛细血管与穿通小动脉自发性破裂形成的病灶，因无明显临床症状，往往不易被察觉。但血管破裂会释放血浆内铁、纤维蛋白原等毒性物质，破坏周边神经元环路。这类损伤可自发发生并终身累积，因此脑微出血负荷与认知衰退、痴呆发病及病情进展密切相关。1 型糖尿病（T1DM）患者发生脑微出血与血管病变的风险显著升高，且胰岛素治疗无法逆转该类病理损伤，因此亟需发掘全新干预策略，修复糖尿病损伤的脑部血管。
受损或破裂血管的修复依赖大脑募集中枢原位及外周免疫细胞。小胶质细胞是一类起源于卵黄囊、定居于中枢神经系统的特异性巨噬细胞。血管损伤发生数分钟内，小胶质细胞便会伸出突起包裹受损微血管，阻挡毒性血浆外渗，恢复血脑屏障（BBB）完整性，该作用可持续数日。原位小胶质细胞是聚集至受损微血管的主要免疫细胞；稳态下血脑屏障会阻隔外周巨噬细胞，但少量外周浸润巨噬细胞同样会响应血管损伤。近期活体成像研究证实，少量循环巨噬细胞可在损伤发生 24～48 小时内募集至脑微出血病灶，并在此处滞留数天。在生理及病理状态下，小胶质细胞与浸润巨噬细胞兼具保护与损伤双重作用，可表现促炎、抗炎两种极化表型。例如，浸润巨噬细胞既可参与破损血管修复、重塑血管结构，也可攻击并吞噬受损血管。与之类似，小胶质细胞在损伤初期通常发挥修复保护作用，但随病程延长，可能加重脑损伤、促进神经元与血管退行性病变。原位小胶质细胞与外周巨噬细胞均会募集至损伤灶，但两类细胞如何决定受损微血管的最终转归（血管再通留存或崩解），仍是亟待阐明的关键科学问题。此外，1 型糖尿病这类慢性炎症疾病会提升血管损伤风险，但其如何调控小胶质细胞 / 巨噬细胞募集、进而影响血管修复进程，目前尚不明确。
本团队前期对健康小鼠开展实验：采用飞秒激光活体诱导微血管破裂后，在为期 14 天的活体观测周期内，所有受损血管均实现再通并稳定留存。但对 1 型糖尿病小鼠施加同等血管损伤后，部分受损微血管最终发生消融。本研究利用两种模型血管修复结局的差异，探究调控微血管修复的细胞分子机制，重点解析糖尿病这类慢性炎症血管病背景下的调控规律。通过分析脑微出血损伤后的基因表达谱，并借助免疫组化鉴定病灶募集的细胞亚群，我们发现糖尿病小鼠脑组织中存在半乳糖凝集素 3（Gal3）阳性巨噬细胞；该类细胞高表达吞噬相关标志物，且大量聚集于最终消融的血管病灶处。本研究结果与既往单细胞转录组研究结论相互印证：疾病或衰老状态下免疫细胞上调 Lgals3（Gal3 编码基因）表达，与阿米巴样吞噬型细胞表型高度相关。通过全身注射荷兰Liposoma氯膦酸脂质体（ClodronateLiposomes：CLR，C-005）清除绝大部分外周吞噬型白细胞后，Gal3 阳性巨噬细胞无法在脑微出血病灶周围聚集，糖尿病小鼠的微血管修复能力显著改善。综上，本研究揭示了脑血管损伤后复杂的细胞应答网络，并First证实 Gal3 阳性巨噬细胞可介导脑部微血管消融，具备全新病理调控功能。
清除巨噬细胞，金标准产品就是荷兰Liposoma的巨噬细胞清除剂氯膦酸盐脂质体ClodronateLiposomes，通过静脉注射，可以清除骨髓，肝脏，脾脏多个部位的驻留巨噬细胞，因此，有一个问题，巨噬细胞清除剂氯膦酸盐脂质体ClodronateLiposomes静脉注射会影响小胶质细胞吗？答案：不会
图. 氯膦酸脂质体（CLR）可清除外周组织定居型巨噬细胞，且不会改变脑内小胶质细胞的数量。
论文信息：
论文题目：Invasion of phagocytic Galectin 3 expressing macrophages in the diabetic brain disrupts vascular repair
期刊名称：Science Advances
时间期卷：Vol 7, Issue34(2021)
在线时间：2021年8月18日
DOI: 10.1126/sciadv.abg2712
产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes&Control Liposomes
办事处：靶点科技
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体静脉注射，清除外周巨噬细胞。荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂ClodronateLiposomes见刊于Science Advances：吞噬型半乳糖凝集素 3 阳性巨噬细胞浸润糖尿病小鼠脑组织会阻碍血管修复。
Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes氯膦酸二钠脂质体清除巨噬细胞的材料和方法：
In vivo macrophage depletion
For drug intervention experiments, mice received intravenous CLR (50 mg/kg; Liposoma B.V.) 2 days before CMB induction, on the day of CMB induction, and 2 days later. This treatment regimen ensured sustained depletion of peripheral macrophages. Diff-Quik histological staining confirmed depletion of circulating immune cells in treated animals.
药物干预实验中，于脑微出血造模前 2 天、造模当日及造模后 2 天，对小鼠尾静脉注射氯膦酸二钠脂质体（CLR，给药剂量 50 mg/kg，厂商：Liposoma B.V.）。该给药方案可实现外周巨噬细胞的持续性清除。经迪夫快速（Diff-Quik）组织染色验证，给药小鼠外周循环免疫细胞已被有效清除。
巨噬细胞清除材料和方法文献截图：吞噬型半乳糖凝集素 3 阳性巨噬细胞浸润糖尿病小鼠脑组织会阻碍血管修复
