PC Biotin-PEG3-azide 是一种可切割 (cleavable) 的含 3 个单元 PEG 的 ADC linker,可用于合成抗体偶联活性分子 (ADC)。PC Biotin-PEG3-azide 是一种点击化学试剂。它含有 Azide 基团,可以和含有 Alkyne 基团的分子发生铜催化的叠氮-炔环加成反应(CuAAc)。它还可以和含有 DBCO 或 BCN 基团的分子发生环张力驱动的炔-叠氮环加成反应 (SPAAC)。

•偶联流程:炔基 / DBCO 分子 + 本试剂点击反应 → 生物素标记复合物
•纯化:链霉亲和素磁珠 / 树脂捕获靶标蛋白 / 核酸
•温和洗脱条件:365 nm 紫外光照(低功率,1–5 mW/cm²),PC 基团断裂,靶标分子完整释放
•优势:不用高温、不用变性剂、不用还原剂,蛋白活性、质谱信号不受破坏;洗脱无杂蛋白污染。
•缺点:试剂更贵;必须全程避光储存 / 操作,见紫外提前降解失效。
•点击偶联、亲和捕获步骤和上面一致
•洗脱缺陷:生物素 - 链霉亲和素结合力强(Kd~10⁻¹⁵ M),只能用强变性条件洗脱:
•95℃高温煮沸
•8 M 尿素 / 6 M 盐酸胍
•游离生物素竞争洗脱(效率低、拖尾严重)
•后果:蛋白易变性、酶活丢失、质谱背景高、低丰度样品损失大。
•优点:稳定性强,不怕光照、储存简单、价格更低。

•蛋白质组学、化学蛋白质组学富集后做质谱(需要天然构象、低背景)
•活细胞标记、酶活保留实验
•怕变性、不能加热 / 加变性剂的弱活性样品
•可逆捕获、可控释放探针构建
•仅做定性检测、Western blot,不需要洗脱回收靶标
•固定化探针、表面修饰、长期稳定标记
•预算有限、不需要回收纯化样品
•实验过程会接触紫外 / 强光,无法避光操作