为了首先验证脾脏巨噬细胞在调控生发中心B细胞反应中的整体作用,使用了先前描述的将白喉毒素受体(DTR)置于CD169启动子下表达的小鼠模型。在这些小鼠中,给予白喉毒素(DT)会导致金属亲和性巨噬细胞以及边缘区巨噬细胞亚群的快速耗竭,包括SIGN-R1⁺MARCO⁺和SIGN-R1⁻MARCO⁺细胞。CD169-DTR⁺/⁻小鼠如上所述与MD4 B细胞和OT-II T细胞共同转移,并用HEL-OVA偶联抗原进行免疫。正如预期,经DT处理的小鼠在边缘区显示出CD169⁺、MARCO⁺和SIGN-R1⁺表达细胞的大量丢失(如图)。在这些条件下,生发中心B细胞频率显著降低(如图)。这些发现与先前一项研究结果一致,该研究报告称,短时间荷兰Liposoma氯膦酸盐脂质体(CLL)处理导致脾脏中所有驻留巨噬细胞群体的暂时性耗竭,同样会导致生发中心B细胞反应的类似缺陷。

CD169-DTR小鼠在过继转移OT-II T细胞和CD45.1⁺ MD4 B细胞之前,于第-5天和第-2天接受两次DT处理或不处理。次日,小鼠经腹腔注射HEL-OVA进行免疫。8天后分析脾脏。(a) 上图为流式细胞术图,显示门控策略以确定滤泡生发中心内CD45.1⁺ MD4 B细胞的频率。下图为经DT处理和未处理小鼠脾脏切片的免疫荧光分析,染色CD169(绿色)、SIGN-R1(蓝色)、IgD(灰色)和MARCO(红色)。每次实验中每组至少分析3只小鼠的切片。(b) 滤泡区室内CD45.1⁺生发中心B细胞的频率。(c) 边缘区B细胞(定义为活细胞、B220⁺CD21^highCD23^low细胞)的频率。
脾脏边缘区巨噬细胞MZM的Marker:SIGN-R1 (CD209b)+,MARCO+
脾脏边缘区噬金属性巨噬细胞MMM的Marker:CD169 (Siglec-1)+,MOMA-1抗体来检测CD169的表达。
MOMA-1本身并不是一个分子,而是一种单克隆抗体的名字,用于识别和标记小鼠体内的特定巨噬细胞。它识别并结合的靶标分子是 CD169(也叫唾液酸黏附素或 Siglec-1)。
● 名称由来:MOMA 是 "Monocytes and Macrophages"(单核细胞和巨噬细胞)的缩写。它是由研究者 Kraal 和 Janse 在1986年报道的一种抗体。
● 靶标分子:MOMA-1抗体所识别的抗原,在很长一段时间内都是未知的。直到2006年,研究才证实它的靶标就是CD169(Sialoadhesin)。
● 应用场景:在免疫学研究中,MOMA-1是识别脾脏中边缘区嗜金属巨噬细胞(MMMs) 的经典工具。它也常被用于标记淋巴结、肠道固有层等其他组织中的特定巨噬细胞亚群。
论文信息:
论文题目:Marginal zone SIGN-R1+ macrophages are essential for the maturation of germinal center B cells in the spleen
期刊名称:PNAS
时间期卷:117 (22) 12295-12305
DOI: 10.1073/pnas.1921673117
产品信息:
货号:CP-010-010
规格:10ml+10ml
品牌:Liposoma
产地:荷兰
名称:Clodronate Liposomes&Control Liposomes
办事处:靶点科技