为了明确特定巨噬细胞亚群的具体贡献,研究者利用荷兰Liposoma氯膦酸盐脂质体(CLL)处理后SIGN-R1⁺巨噬细胞恢复速度较慢的特点,研究了一个时间窗口——在此窗口期内SIGN-R1⁺MARCO⁺细胞缺失,但SIGN-R1⁻MARCO⁺细胞和CD169⁺细胞均已恢复(7)。在CLL给药后3周,小鼠过继转移MD4 B细胞和OT-II T细胞并按上述方案进行免疫。对照组动物接受磷酸盐缓冲液(PBS)包被的脂质体(PBS-L)处理,该处理对生发中心B细胞反应无显著影响(图2C)。免疫荧光(IF)分析证实,在CLL处理的小鼠中SIGN-R1⁺巨噬细胞被选择性清除,但CD169⁺和MARCO⁺细胞未被清除(图2A)。边缘区B细胞的频率也与对照组处理动物相似,证实其已恢复(图2B)。选择性清除SIGN-R1⁺巨噬细胞足以损害生发中心反应并降低生发中心B细胞频率,这与在DT处理的CD169-DTR动物中观察到的缺陷相似(图2C)。

SIGN-R1⁺巨噬细胞的耗竭损害生发中心B细胞反应。(A–E) 在过继转移OT-II T细胞和CD45.1⁺ MD4 B细胞之前3周,受体小鼠经静脉注射氯膦酸盐脂质体(CLL)或PBS脂质体(PBS-L),随后进行HEL-OVA免疫。8天后分析脾脏。(A) 经免疫的PBS-L处理组和CLL处理组小鼠脾脏切片的免疫荧光分析。白色方框标示右侧所示的高倍放大视图。(B) 边缘区B细胞的频率。(C) HEL特异性生发中心B细胞的频率。A–C中的数据代表至少五次独立实验中的一次。“未处理"组为未接受CLL或PBS-L的免疫小鼠。(D) 小鼠经CLL或PBS-L处理,3周后以Ribi佐剂中的PE进行腹腔免疫。(左)用于确定PE⁺生发中心B细胞频率的门控策略。(右)免疫后10天B细胞区室中PE特异性生发中心B细胞的频率。数据代表三次独立实验中的一次。(E) 在流感病毒鼻内感染前3周经PBS-L或CLL处理的小鼠,其脾脏(左)和纵隔淋巴结(右)中生发中心B细胞的频率。生发中心B细胞在感染后10天鉴定为B220⁺IgD^lowFAS⁺GL7⁺活细胞。数据代表两次独立实验中的一次。(F) SIGN-R1-Cre/DTR⁺/⁻dTomato⁺/⁻小鼠脾脏切片的免疫荧光分析。(G) 经DT处理或未处理的SIGN-R1-Cre/DTR⁺/⁻小鼠的脾脏。(H和I) 经PE免疫后7天,DT处理或未处理的SIGN-R1-Cre/DTR⁺/⁻小鼠脾脏中生发中心B细胞反应。(H) 按所示染色的免疫荧光分析。(I) PE特异性生发中心B细胞的门控策略(左)和频率(右)。数据来自所进行的三次实验中的一次代表性实验。A和F–H中分析的切片来自每次实验每组至少三只小鼠。
脾脏边缘区巨噬细胞MZM的Marker:SIGN-R1 (CD209b)+,MARCO+
脾脏边缘区噬金属性巨噬细胞MMM的Marker:CD169 (Siglec-1)+,MOMA-1抗体来检测CD169的表达。
MOMA-1本身并不是一个分子,而是一种单克隆抗体的名字,用于识别和标记小鼠体内的特定巨噬细胞。它识别并结合的靶标分子是 CD169(也叫唾液酸黏附素或 Siglec-1)。
● 名称由来:MOMA 是 "Monocytes and Macrophages"(单核细胞和巨噬细胞)的缩写。它是由研究者 Kraal 和 Janse 在1986年报道的一种抗体。
● 靶标分子:MOMA-1抗体所识别的抗原,在很长一段时间内都是未知的。直到2006年,研究才证实它的靶标就是CD169(Sialoadhesin)。
● 应用场景:在免疫学研究中,MOMA-1是识别脾脏中边缘区嗜金属巨噬细胞(MMMs) 的经典工具。它也常被用于标记淋巴结、肠道固有层等其他组织中的特定巨噬细胞亚群。
论文信息:
论文题目:Marginal zone SIGN-R1+ macrophages are essential for the maturation of germinal center B cells in the spleen
期刊名称:PNAS
时间期卷:117 (22) 12295-12305
DOI: 10.1073/pnas.1921673117
产品信息:
货号:CP-010-010
规格:10ml+10ml
品牌:Liposoma
产地:荷兰
名称:Clodronate Liposomes&Control Liposomes
办事处:靶点科技